外源性LTB4对CIA小鼠Treg/Th17脾细胞分化的作用

摘要

目的 探讨外源性白三烯B4(LTB4)对胶原诱导型关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)小鼠脾细胞调节性T细胞(Treg)和Th17细胞分化的调节, 进一步阐明LTB4在类风湿关节炎(RA)发病中的作用机制.方法 建立CIA小鼠模型,取造模d 28的脾细胞,体外实验分析外源性LTB4对Treg和Th17细胞分化的影响.应用流式细胞术检测CD4+CD25+Foxp3+细胞的数量,荧光定量PCR技术检测调控Treg和Th17细胞分化的特异性转录因子Foxp3和RORγt的mRNA的表达,酶联免疫吸附(ELISA)方法检测培养细胞上清IL-17的含量.结果 成功建立CIA小鼠模型;造模d 28分离小鼠脾细胞,体外培养加入鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)共同孵育,随着LTB4浓度增加 (0.01、0.1、1 μmol·L-1),CD4+CD25+Foxp3+细胞数量相应减少,Foxp3 mRNA的表达相应降低;相反,IL-17的含量相应增加,RORγt mRNA的表达相应升高.结论 LTB4抑制CIA模型脾细胞Treg细胞的分化,促进Th17细胞的分化,提示LTB4在CIA发病过程中具有一定的促炎活性.