Foxp3

摘要： 背景:粪肠球菌作为优势菌的难治性根尖周炎是一种经过反复多次的根管治疗之后仍然伴随着持续性炎症和骨吸收的疾病。多种实验表明,叉头样转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)通过影响机体自身免疫反应参与各种炎症疾病。目的:观察Foxp3在粪肠球菌感染的大鼠难治性根尖周炎病变中的表达情况。方法:6周龄SD大鼠32只,随机各挑选16只分成未封菌组和封菌组。将32只大鼠在无痛条件下行双侧下颌第1磨牙中央窝开髓,未封菌组放入PBS小棉球,封菌组放入粪肠球菌混悬液小棉球,随后在双侧内髓腔放置流动树脂后光固化。常规水食室温饲养,于1,2,3,4周两组各随机选取4只大鼠取下颌骨组织;并以0周大鼠未做开髓处理为空白对照组。用苏木精-伊红染色观察大鼠根尖周部位的炎症组织病理变化;RT-PCR和免疫组织化学检测根尖周组织Foxp3的表达变化。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示:未封菌组、封菌组大鼠根尖周炎的动物模型均建立成功,根尖周围组织区域均可见到明显的炎性细胞的浸润;②RT-PCR结果显示:Foxp3在未封菌组根尖周组织区域的mRNA表达水平呈现1-4周逐步递增;封菌组根尖区组织Foxp3的mRNA表达水平在3周达到高峰后下降,在2,4周与未封菌组比较,差异有显著性意义(P<0.05);③免疫组织化学结果显示:未封菌组中Foxp3的阳性细胞表达量随着时间递增,封菌组在第3周表达高峰后第4周下降,与RT-PCR的结果一致(P<0.05);④结论:Foxp3参与慢性根尖周炎和难治性根尖周炎的进展过程;在炎症慢性期,Foxp3在难治性根尖周炎中表达明显降低,提示其可能与粪肠球菌有一定的关系。

摘要： 目的探讨子痫前期(PE)患者胎盘组织中微RNA(miR)-210、Foxp3的表达及临床意义。方法选择2018年6月至2019年12月南阳市中心医院收治的且以剖宫产方式分娩的36例PE患者为PE组,选择同期正常妊娠孕妇35例为正常妊娠组,另选择体检健康的未妊娠女性40例为未妊娠组。采用流式细胞术检测3组受试者外周静脉血CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)调节性T细胞(Treg细胞)、CD4^(+)辅助性T淋巴细胞(Th细胞)水平,计算CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)Treg细胞与CD4^(+)Th细胞的比值(CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)/CD4^(+));采用酶联免疫吸附试验检测3组受试者血清白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17水平;实时荧光定量聚合酶链反应法检测PE组和正常妊娠组受试者胎盘组织中Foxp3 mRNA、miR-210表达,Western blot法检测胎盘组织中Foxp3蛋白表达。结果PE组、正常妊娠组与未妊娠组受试者外周静脉血CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)/CD4^(+)分别为(6.72±0.31)%、(8.92±0.37)%、(8.85±0.34)%;PE组受试者外周静脉血CD4^(+)CD25^(+)CD127^(-)/CD4^(+)显著低于正常妊娠组和未妊娠组(t=27.136、28.581,P0.05)。3组受试者血清IL-6、IL-10、IL-17水平比较差异有统计学意义(F=53.584、133.925、42.392,P0.05)。PE组受试者血清IL-10水平显著低于正常妊娠组和未妊娠组(t=14.929、4.892,P<0.05),正常妊娠组受试者血清IL-10水平显著高于未妊娠组(t=10.914,P<0.05)。PE组受试者血清IL-17水平显著高于正常妊娠组和未妊娠组(t=8.184、3.038,P<0.05),正常妊娠组受试者血清IL-17水平显著低于未妊娠组(t=7.325,P<0.05)。PE组受试者胎盘组织中Foxp3 mRNA相对表达量显著低于正常妊娠组(t=13.948,P<0.05),miR-210相对表达量显著高于正常妊娠组(t=16.565,P<0.05)。PE组和正常妊娠组受试者胎盘组织中Foxp3蛋白相对表达量分别为0.97±0.11、1.38±0.18,PE组受试者胎盘组织中Foxp3蛋白相对表达量显著低于正常妊娠组(t=11.625,P<0.05)。结论PE患者外周静脉血Treg细胞水平显著降低,Treg/Th17细胞失衡,可破坏母体对胎儿的免疫耐受;PE患者胎盘组织中Foxp3表达水平下降可能与miR-210表达上调有关。

摘要： 目的:探讨0.1%纳米银溶液用于根管封药对慢性根尖周炎大鼠RORγT、IL-17、Foxp3表达的影响。方法:对40只雄性大鼠双侧下颌第一磨牙开髓建立根尖周炎模型,术后2周处死4只大鼠用RVG+HE判断造模成功,将剩余36只大鼠随机均分为空白对照组(K组),氢氧化钙组(Q组)及0.1%纳米银溶液组(N组)。于用药后7、14、21 d各组随机处死4只大鼠,免疫组织化学检测Foxp3表达,qRT-PCR检测RORγT、IL-17的表达。结果:免疫组化显示3组于用药7、14、21 d时Foxp3表达呈逐渐上升趋势,N、Q组均高于K组(P0.05),RORγT表达有差异(P<0.05)。结论:0.1%纳米银溶液用于根管封药效果好,可降低RORγT、IL-17水平,促进Foxp3的表达。

摘要： 目的观察金水六君煎加减联合西药治疗支气管哮喘慢性持续期肺肾两虚证的疗效。方法选取2020年3月—2021年3月在福建省人民医院呼吸科门诊就诊的2、3级支气管哮喘慢性持续期肺肾两虚证患者60例,按照随机数字表法分为观察组和对照组各30例。对照组给予信必可都保吸入治疗,观察组在对照组基础上加用金水六君煎加减口服,疗程均为8周。比较2组疗效及治疗前后哮喘控制水平测试(ACT)评分、肺功能(FEV1、PEF)、呼出气一氧化氮(FeNO)、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Treg比例及调节性T细胞(Tregs)数量的变化情况。结果观察组总有效率为93.33%,优于对照组的73.33%(P<0.05);与治疗前比较,2组治疗后ACT评分、FEV1、PEF、CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Tregs比例均明显升高,且观察组升高更为明显(P均<0.05);与治疗前比较,2组治疗后FeNO及Tregs数量均降低,且观察组降低更为明显(P均<0.05)。结论金水六君煎加减联合西药治疗可有效地改善支气管哮喘患者的临床症状,提高总有效率。其作用机制可能是增加CD4^(+)CD25^(+)Foxp3^(+)Tregs数量,改善外周免疫反应,增加机体对过敏原的耐受性,抑制哮喘发展过程中的炎症反应。

摘要： 目的探讨进展期胃癌组织中ESM-1、IGFBP3、FOXP3的表达及对患者预后的影响。方法选取进展期胃癌患者100例,收集患者临床资料,免疫组化检测ESM-1、IGFBP3和FOXP3水平。结果胃癌组织ESM-1、IGFBP3、FOXP3蛋白表达与患者年龄、性别均无相关性(P>0.05),ESM-1表达与神经侵犯、淋巴结转移、TNM分期显著相关(P<0.05);IGFBP3表达与血管癌栓、神经侵犯、病理分化、淋巴结转移、TNM分期显著相关(P<0.05);FOXP3表达与肿瘤病理分化、淋巴结转移显著相关(P<0.05)。单因素Cox回归分析:患者3年RFS与肿瘤病理分化、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、ESM-1、IGFBP3、FOXP3高表达之间存在相关性(P<0.05),多因素Cox回归分析结果显示,患者3年RFS与ESM-1、IGFBP3、FOXP3高表达存在显著相关性(P<0.05)。结论ESM-1、IGFBP3、FOXP3异常表达与胃癌的发生发展密切相关,ESM-1、IGFBP3、FOXP3异常表达有望成为预测进展期胃癌患者预后的生物学指标。

摘要： 目的探讨转录因子FOXP3在激素受体阳性乳腺癌组织中的表达及其对MCF-7细胞侵袭和迁移的影响。方法收集2010年9月-2011年10月河北医科大学第四医院乳腺中心收治的66例激素受体阳性乳腺癌患者的石蜡标本,采用免疫组化检测组织中FOXP3的表达情况,分析FOXP3表达与临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier法分析FOXP3表达与激素受体阳性乳腺癌预后的关系。采用qRT-PCR检测5种乳腺癌细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-453、MDA-MB-474、BR-3和MCF-7)中FOXP3mRNA的相对表达量,选取FOXP3表达量最高的MCF-7细胞系进行基因沉默。设置si-FOXP3转染组(转染si-FOXP3)、si-NC转染组(转染si-NC)与空白对照组(不做处理),采用Western blotting检测FOXP3蛋白的表达,划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。结果FOXP3蛋白在激素受体阳性乳腺癌细胞质和细胞核中均有表达,细胞核FOXP3阳性表达率为40.9%(27/66),且在无淋巴结转移、Ki-67低表达、Luminal A型及TNM分期Ⅰ期乳腺癌组织中阳性表达率较高(P<0.05);细胞质FOXP3阳性表达率为54.6%(36/66)。Kaplan-Meier生存分析显示,细胞核FOXP3阳性组总生存率明显高于阴性组[96.30%(26/27)vs.82.05%(32/39),P=0.042],而细胞质FOXP3阳性组与阴性组总生存率差异无统计学意义[88.89%(32/36)vs.86.67%(26/30),P=0.715]。qRT-PCR检测结果显示,MCF-7细胞系FOXP3 mRNA相对表达量最高(P<0.05);沉默FOXP3后,MCF-7细胞的迁移和侵袭能力均较空白对照组明显增强(P<0.05)。结论FOXP3在激素受体阳性乳腺癌中的预后意义与表达部位相关,细胞核FOXP3的表达可提高总生存率,但细胞质FOXP3的意义尚不明确。FOXP3在乳腺癌MCF-7细胞系中发挥抑制细胞迁移和侵袭的抑癌作用,可作为激素受体阳性乳腺癌的潜在分子标志物。

摘要： 目的:探讨天然CD25和FOXP3抗体在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血浆表达变化的临床意义及其作为诊断标志物的潜能。方法:选取青岛大学附属青岛市立医院胸外科首次确诊且未经任何治疗的NSCLC患者200例及同期性别、年龄、吸烟史相匹配的健康志愿者190例,收集两组血液样本。基于CD25及FOXP3分子结构,利用表位预测软件(http://www.iedb.org)设计并合成3条线性抗原肽(即CD25a、CD25b、FOXP3)并外送化工公司合成,通过自行建立的优化ELISA检测方法,检测NSCLC患者及健康对照组血浆CD25及FOXP3抗体的表达水平,并分析CD25及FOXP3抗体的表达与临床病理特征之间的关系。同时绘制ROC曲线,评估CD25及FOXP3抗体对不同TNM分期NSCLC的诊断价值。结果:NSCLCⅡ~Ⅳ期患者血浆CD25a、FOXP3抗体的表达较健康对照组显著增加(0.66±0.18 vs 0.52±0.17,P0.05)。CD25b抗体的表达与性别、年龄、肿瘤分化程度有关(P均0.05),而FOXP3抗体的表达仅与肿瘤分化程度有关(P<0.05)。对CD25、FOXP3抗体诊断NSCLC的效能评估,CD25a曲线下面积为0.727(95%CI:0.677~0.778),最佳截断值为0.55,敏感度为77%,特异度为64%;CD25b曲线下面积为0.601(95%CI:0.545~0.657),最佳截断值为0.35,敏感度为62%,特异度为57%;FOXP3曲线下面积为0.613(95%CI:0.557~0.669),最佳截断值为0.54,敏感度为58%,特异度为65%。结论:检测CD25a天然抗体可辅助NSCLC的早期诊断;血浆CD25b天然抗体在早期NSCLC(Ⅰ+Ⅱ期)表达降低,对预测早期NSCLC有一定价值。

摘要： 目的:探讨参苓白术散对溃疡性结肠炎(UC)大鼠Th_(17)/Treg免疫平衡的影响。方法:选择SPF级SD大鼠60只,随机分为空白组、模型组、参苓白术散低剂量组、参苓白术散中剂量组、参苓白术散高剂量组和美沙拉嗪组,每组10只。除空白组外,其余5组大鼠均采用三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇灌肠法造模。参苓白术散低、中、高剂量组分别给予11.3、22.6、45.2g/kg参苓白术散水煎液灌胃,美沙拉嗪组给予0.4g/kg美沙拉嗪灌胃,空白组与模型组分别给予与美沙拉嗪组等体积0.9%氯化钠注射液灌胃,每日1次,持续14d。给药7、14d后,比较6组大鼠疾病活动指数(DAI)评分;给药14d后,比较6组大鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平,大鼠外周血Th_(17)、Treg细胞水平和Th_(17)/Treg值,以及结肠组织RORγt、FoxP3表达水平。结果:给药7d后,参苓白术散中、高剂量组及美沙拉嗪组DAI评分均低于模型组(P0.05)。给药14d后,参苓白术散各组及美沙拉嗪组DAI评分均低于模型组(P0.05)。结论:参苓白术散对UC大鼠的保护作用可能与调节RORγt/FoxP3表达水平、纠正Th_(17)/Treg免疫失衡有关。

摘要： 目的:观察针刺对缺血性中风大鼠肠道、脑组织中FoxP3、IL-17的影响,探讨针刺对脑损伤的调控机制。方法:选取雄性Wistar大鼠50只,针刺组、手法组、电针组采用鱼线栓塞法制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,手术组手术操作与模型组相似但不再灌注,对照组未执行任何操作。针刺组给予常规针刺,手法组于常规针刺得气后予手法操作,电针组于常规针刺得气后予电针操作。干预14d后,收集各组大鼠的肠组织和脑组织样本,采用酶联免疫吸附法检测免疫细胞因子FoxP3、白细胞介素-17(IL-17)情况。结果:干预后,手术组肠脑组织FoxP3、IL-17含量均高于空白组,针刺组、手法组、电针组FoxP3含量高于手术组,IL-17含量低于手术组,且手法组优于针刺组和电针组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺对MCAO模型大鼠脑肠组织的FoxP3、IL-17具有显著调节作用,其中手法组效果最为明显。

摘要： 目的:探讨Foxp3和SMARCE1在宫颈癌中表达水平及其相关临床意义。方法:选取60例宫颈癌组织作为研究对象,通过免疫组织化学检测癌组织中Foxp3和SMARCE1的表达水平,分析宫颈癌组织中Foxp3和SMARCE1的表达与患者临床病理资料的相关性;免疫组化检测SMARCE1在宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中的表达;质粒构建及转染、Western blot、细胞免疫荧光、双荧光素酶、染色质免疫共沉淀等分子生物学实验检测Foxp3和SMARCE1表达的相关性。结果:Foxp3蛋白表达与宫颈癌更高的临床分期有关(P<0.05);SMARCE1蛋白与宫颈癌的淋巴结转移有关(P<0.05);Foxp3和SMARCE1蛋白的表达呈正相关(P<0.05);SMARCE1蛋白在宫颈高级别上皮内瘤变组织中的表达强于其在低级别上皮内瘤变(P<0.05);Foxp3可增强SMARCE1蛋白的表达,并可转录激活SMARCE1促进其表达。结论:宫颈癌中Foxp3和SMARCE1蛋白的表达成正相关,Foxp3可转录激活SMARCE1表达,参与宫颈癌的发生发展。

摘要： 目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，PFoxp3蛋白表达变化相似，均随MCMV感染时间延长而增加，在感染后6d分别增至健康对照组的2倍和3倍水平;TGF-β在成纤维细胞中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3d后的3.15±0.54，共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3d增至(3.85±0.32)ng/mL，与感染前(1.74±0.14)ng/mL比较有统计学意义(P<0.05)。rn 结论：MCMV感染MEF后可刺激共培养体系中T细胞发挥免疫保护作用，但是随感染时间延长，MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化，增殖的Treg进而抑制T细胞的抗病毒效应，使得病毒不能被有效清除。

摘要： 目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，PFoxp3蛋白表达变化相似，均随MCMV感染时间延长而增加，在感染后6d分别增至健康对照组的2倍和3倍水平;TGF-β在成纤维细胞中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3d后的3.15±0.54，共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3d增至(3.85±0.32)ng/mL，与感染前(1.74±0.14)ng/mL比较有统计学意义(P<0.05)。rn 结论：MCMV感染MEF后可刺激共培养体系中T细胞发挥免疫保护作用，但是随感染时间延长，MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化，增殖的Treg进而抑制T细胞的抗病毒效应，使得病毒不能被有效清除。

摘要： 目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，PFoxp3蛋白表达变化相似，均随MCMV感染时间延长而增加，在感染后6d分别增至健康对照组的2倍和3倍水平;TGF-β在成纤维细胞中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3d后的3.15±0.54，共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3d增至(3.85±0.32)ng/mL，与感染前(1.74±0.14)ng/mL比较有统计学意义(P<0.05)。rn 结论：MCMV感染MEF后可刺激共培养体系中T细胞发挥免疫保护作用，但是随感染时间延长，MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化，增殖的Treg进而抑制T细胞的抗病毒效应，使得病毒不能被有效清除。

摘要： 目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，PFoxp3蛋白表达变化相似，均随MCMV感染时间延长而增加，在感染后6d分别增至健康对照组的2倍和3倍水平;TGF-β在成纤维细胞中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3d后的3.15±0.54，共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3d增至(3.85±0.32)ng/mL，与感染前(1.74±0.14)ng/mL比较有统计学意义(P<0.05)。rn 结论：MCMV感染MEF后可刺激共培养体系中T细胞发挥免疫保护作用，但是随感染时间延长，MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化，增殖的Treg进而抑制T细胞的抗病毒效应，使得病毒不能被有效清除。

摘要： 目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，PFoxp3蛋白表达变化相似，均随MCMV感染时间延长而增加，在感染后6d分别增至健康对照组的2倍和3倍水平;TGF-β在成纤维细胞中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3d后的3.15±0.54，共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3d增至(3.85±0.32)ng/mL，与感染前(1.74±0.14)ng/mL比较有统计学意义(P<0.05)。rn 结论：MCMV感染MEF后可刺激共培养体系中T细胞发挥免疫保护作用，但是随感染时间延长，MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化，增殖的Treg进而抑制T细胞的抗病毒效应，使得病毒不能被有效清除。

摘要： 目的：研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)感染对共培养体系中调节性T细胞(Treg)的诱导作用和Treg在抗病毒免疫中的调节作用。rn 方法：建立小鼠T淋巴细胞与感染CMV的同系小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)体外共培养的细胞模型。蚀斑法检测共培养上清液中感染性病毒量；细胞计数法分析体系中T细胞的扩增情况；流式细胞术检测共培养体系中CV4+CD25+Treg细胞比率，Western印迹法检测T细胞中Foxp3蛋白表达强度；RT-PCR法检测成纤维细胞中TGF-β mRNA表达水平；ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β蛋白表达水平。计量资料结果用x±s表示，组间差异采用单因素方差分析，以P<0.05为具有统计学意义。rn 结果：T细胞与MCMY感染的MEF共培养1d和3d后，培养上清液中病毒负荷量较对照组显著减少；但是共培养6d后，T细胞的免疫保护作用消失，病毒量[(5.58×105)PFU/mL]与感染对照组[(6.05×106)PFU/mL]比较差异无统计学意义。CMV感染3d后,T细胞数目由感染前的(2.02±0.05)×106/mL增至(2.25±0.05)×106/mL，PFoxp3蛋白表达变化相似，均随MCMV感染时间延长而增加，在感染后6d分别增至健康对照组的2倍和3倍水平;TGF-β在成纤维细胞中的基因转录水平(A值)由感染前的1.09±0.13增至感染3d后的3.15±0.54，共培养上清液中的蛋白表达强度在感染后3d增至(3.85±0.32)ng/mL，与感染前(1.74±0.14)ng/mL比较有统计学意义(P<0.05)。rn 结论：MCMV感染MEF后可刺激共培养体系中T细胞发挥免疫保护作用，但是随感染时间延长，MCMV可能通过促进TGF-β表达等多种途径诱导Treg增殖活化，增殖的Treg进而抑制T细胞的抗病毒效应，使得病毒不能被有效清除。

摘要： 目的：调查慢性乙型肝炎患者TGF-131与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常的相互关系。方法：将实验对象分为慢性活动性乙型肝炎患者(CAH)、无症状HBV携带者(AsC)、乙肝感染恢复者(Resolved)、正常人(NS)4组。通过流式细胞术分析外周CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表型和频率以及实时荧光定量PCR分析Foxp3表达水平;并通过ELISA方法检测血清中TGF-β1水平。结果：CAH或AsC组外周CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA表达水平显著高于NS或乙肝感染恢复者,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性乙型肝炎患者血清中TGF-β1水平显著高于健康对照或恢复者,并与CD4+CD25+T细胞频率存在显著正相关(r=0.78,p<0.0001)。结论：慢性乙型肝炎(CHB)患者TGF-β1与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞增高有密切关系。

摘要： 目的：调查慢性乙型肝炎患者TGF-131与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常的相互关系。方法：将实验对象分为慢性活动性乙型肝炎患者(CAH)、无症状HBV携带者(AsC)、乙肝感染恢复者(Resolved)、正常人(NS)4组。通过流式细胞术分析外周CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表型和频率以及实时荧光定量PCR分析Foxp3表达水平;并通过ELISA方法检测血清中TGF-β1水平。结果：CAH或AsC组外周CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA表达水平显著高于NS或乙肝感染恢复者,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性乙型肝炎患者血清中TGF-β1水平显著高于健康对照或恢复者,并与CD4+CD25+T细胞频率存在显著正相关(r=0.78,p<0.0001)。结论：慢性乙型肝炎(CHB)患者TGF-β1与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞增高有密切关系。

摘要： 目的：调查慢性乙型肝炎患者TGF-131与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常的相互关系。方法：将实验对象分为慢性活动性乙型肝炎患者(CAH)、无症状HBV携带者(AsC)、乙肝感染恢复者(Resolved)、正常人(NS)4组。通过流式细胞术分析外周CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表型和频率以及实时荧光定量PCR分析Foxp3表达水平;并通过ELISA方法检测血清中TGF-β1水平。结果：CAH或AsC组外周CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA表达水平显著高于NS或乙肝感染恢复者,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性乙型肝炎患者血清中TGF-β1水平显著高于健康对照或恢复者,并与CD4+CD25+T细胞频率存在显著正相关(r=0.78,p<0.0001)。结论：慢性乙型肝炎(CHB)患者TGF-β1与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞增高有密切关系。

摘要： 目的：调查慢性乙型肝炎患者TGF-131与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞异常的相互关系。方法：将实验对象分为慢性活动性乙型肝炎患者(CAH)、无症状HBV携带者(AsC)、乙肝感染恢复者(Resolved)、正常人(NS)4组。通过流式细胞术分析外周CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的表型和频率以及实时荧光定量PCR分析Foxp3表达水平;并通过ELISA方法检测血清中TGF-β1水平。结果：CAH或AsC组外周CD4+T细胞中CD4+CD25+Foxp3+T细胞频率以及CD4+CD25+T细胞中Foxp3 mRNA表达水平显著高于NS或乙肝感染恢复者,差异有统计学意义(P<0.05)。慢性乙型肝炎患者血清中TGF-β1水平显著高于健康对照或恢复者,并与CD4+CD25+T细胞频率存在显著正相关(r=0.78,p<0.0001)。结论：慢性乙型肝炎(CHB)患者TGF-β1与CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞增高有密切关系。

摘要： 本发明涉及细胞生物学技术领域，尤其涉及一种通过FOXP1基因编辑和突变延缓间充质干细胞衰老的方法。包括以下步骤：(1)分离和培养人源脐带间充质干细胞；(2)将质粒、供体DNA、脂质体加入到步骤(1)得到的培养液中进行转染；(3)将步骤(2)转染后的人源脐带间充质干细胞转入含青霉素、链霉素的人源脐带间充质干细胞培养基进行培养；(4)将步骤(3)培养后的人源脐带间充质干细胞进行筛选培养；(5)将步骤(4)培养后的人源脐带间充质干细胞消化传代，待扩增至获得稳传的细胞株即可。与现有技术相比，本发明能明显促进间充质干细胞增殖速度快1倍，延缓其细胞衰老进程达50％的效率。

摘要： 本发明公开了环状RNA circ‑FOXP1的用途，本发明首先证实了circ‑FOXP1基因的客观存在；通过检测胰腺癌病人中circ‑FOXP1基因表达情况，发现其表达水平明显提高；通过对circ‑FOXP1基因进行细胞功能学的研究，发现过表达circ‑FOXP1基因的胰腺癌细胞生长速度增快、凋亡水平下调，下调circ‑FOXP1基因胰腺癌细胞株生长速度降低，凋亡水平显著提高。circ‑FOXP1基因及其表达产物作为诊断胰腺癌的标志物，使胰腺癌诊断更加准确、快速，作为制备治疗胰腺癌药物的靶基因，为治疗胰腺癌提供了新的治疗靶点和治疗途径。

摘要： 本发明公开了一种筛选抑制FOXP3小分子药物的方法。在肿瘤微环境中，Treg细胞具有抑制其他T细胞免疫反应的功能，协助肿瘤生长。靶向抑制肿瘤微环境中Treg中FOXP3功能可以解除Treg的免疫抑制作用，提升机体抗癌能力。本发明通过NanoBiT活细胞蛋白互作检测技术，结合FDA批准小分子药物库，对能有效抑制FOXP3和TRAF6相互作用的小分子进行筛选，并且通过完善的免疫荧光染色技术，体外Treg功能性实验，以及荷瘤小鼠模型验证了小分子的效力。

摘要： 本发明公开了Foxp3阳性巨噬细胞在制备治疗急性脑梗死药物中的应用。本发明首次通过单细胞测序、免疫荧光、WB、流式细胞术等多重方法在脑卒中的病灶中发现Foxp3阳性的巨噬细胞。对Foxp3阳性的巨噬细胞进行功能分析我们发现Foxp3阳性的巨噬细胞吞噬死亡神经元、受损的髓鞘以及浸润的中性粒细胞的能力增强。在巨噬细胞中特异性地敲除Foxp3将下调巨噬细胞对死亡神经元、受损髓鞘的吞噬，下调巨噬细胞清除神经炎症的能力，最终加重急性脑卒中病情。表明Foxp3阳性巨噬细胞可应用于制备治疗急性脑梗死和/或急性无菌性炎症的药物。

摘要： 本发明涉及抑制RORγt表达或促进Foxp3表达的物质在哮喘预防治疗药物中的应用，属于医药技术领域，解决现有PM2.5各个成分对哮喘患者的免疫机制影响不清楚的技术问题。解决方案为：抑制RORγt表达或促进Foxp3表达的物质在哮喘预防治疗药物中的应用，所述哮喘包括支气管哮喘、变应性哮喘、运动诱发性哮喘、药物诱发性哮喘和粉尘诱发性哮喘。抑制RORγt表达或促进Foxp3表达的物质可以抑制CD4+细胞向Th17细胞分化或促进CD4+细胞向Treg细胞分化。抑制RORγt表达或促进Foxp3表达的物质抑制相关炎症因子的产生。本发明充分表明了针对Th17细胞抑制剂或Treg细胞激动剂作为预防大气污染加重哮喘的药物进行应用。

摘要： 本发明涉及一种包含12至25个核苷酸的寡核苷酸，其中核苷酸中的至少一个包含从桥接核酸如LNA、ENA、2'氟修饰的核苷酸、2O‑甲基修饰的核苷酸、2O‑甲氧基修饰的核苷酸、FANA以及它们的组合中选择的修饰。寡核苷酸与SEQ ID NO.1的和/或SEQ ID NO.2的Foxp3杂交，使得FoxP3mRNA、FoxP3前‑mRNA或它们的组合的表达降低。本发明还涉及一种包含本发明的寡核苷酸的药物组合物，并且分别涉及在预防和/或治疗涉及FoxP3失衡的病症的方法中使用的寡核苷酸和药物组合物。

摘要： 本发明涉及生物医药学技术领域，尤其涉及一种circleFOXP1RNA分子及其合成方法与应用。circleFOXP1RNA分子的合成包括如下步骤：(1)以线性化的FOXP1DNA为模板，进行转录，得到线性化的FOXP1RNA；(2)将线性化的FOXP1RNA进行连接，得到circleFOXP1RNA。本发明合成得到的circleFOXP1RNA分子能够促进FOXP1基因的表达，促进间充质干细胞增殖，延缓间充质干细胞衰老，还能促进软骨再生，抑制关节炎。

摘要： 本文所述的发明的方面涉及将FOXP3 cDNA(例如全长人密码子优化的cDNA)并入FOXP3基因或非FOXP3基因座中，从而在原代人CD34+细胞或源自经编辑的CD34+细胞的细胞中提供组成型或调控型FOXP3表达。在一些实施方式中，将导向至FOXP3、AAVS1或其它候选基因座的向导RNA序列用于CRISPR/Cas9介导的基因调控，并提供了用于基于HDR的基因修饰的基因递送盒。

摘要： 本发明涉及包含脱氧核糖核苷酸和2'‑脱氧‑2'‑氟‑β‑D‑阿拉伯糖核苷酸的杂合嵌合体反义寡核苷酸及其使用方法，所述杂合嵌合体反义寡核苷酸结合到Foxp3mRNA。所述方法包含用于降低Foxp3基因的表达水平，提高抗肿瘤活性和治疗受试者中的癌症的用途。

摘要： 本发明涉及细胞生物学技术领域，尤其涉及一种通过FOXP1基因编辑和突变延缓间充质干细胞衰老的方法。包括以下步骤：(1)分离和培养人源脐带间充质干细胞；(2)将质粒、供体DNA、脂质体加入到步骤(1)得到的培养液中进行转染；(3)将步骤(2)转染后的人源脐带间充质干细胞转入含青霉素、链霉素的人源脐带间充质干细胞培养基进行培养；(4)将步骤(3)培养后的人源脐带间充质干细胞进行筛选培养；(5)将步骤(4)培养后的人源脐带间充质干细胞消化传代，待扩增至获得稳传的细胞株即可。与现有技术相比，本发明能明显促进间充质干细胞增殖速度快1倍，延缓其细胞衰老进程达50％的效率。