二氯乙酸盐协同维生素C抑制神经胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭及其作用机制

摘要

目的探讨二氯乙酸盐(dichloroacetate,DCA)与维生素C(vitamin C,VC)联合对胶质瘤U87和U251细胞恶性行为影响及机制。方法以不同浓度的DCA单用或联合5 mmol·L^(-1)的VC处理U87和U251细胞,CCK-8法检测各组增殖率后计算协同指数。以DMSO、15 mmol·L^(-1) DCA、5 mmol·L^(-1) VC及两者联合处理U87和U251细胞,体外实验检测各组克隆形成、活性氧含量、凋亡、周期、迁移和侵袭变化;皮下成瘤模型检测各组U251细胞体内增殖情况。应用网络药理分析DCA和VC共同作用靶点及其在胶质瘤中的价值后,Western blot检测各组细胞中BCL2A1和CDC25A的表达水平和降解率,以及CDK4、CDK6、cytochrome C、caspase-7和cleaved-caspase-7的表达水平。结果15 mmol·L^(-1) DCA与5 mmol·L^(-1) VC联合指数最大。与对照和单药组相比,联合组细胞体外克隆形成、迁移和侵袭能力明显降低,体内增殖率降低,活性氧含量、凋亡率和G 1期阻滞率明显增加。BCL2A1和CDC25A蛋白为DCA和VC在神经胶质瘤中的重要靶点;与对照和单药组相比,联合组细胞中的BCL2A1、CDC25A、CDK4和CDK6的表达量明显减少,Cytochrome C和cleaved-caspase-7的表达量明显增加,且联合组细胞中BCL2A1和CDC25A蛋白降解率明显增加。结论VC能够协同DCA促进BCL2A1和CDC25A的降解,抑制神经胶质瘤细胞的恶性行为。