应用快速免疫层析法检测恙虫病特异性IgM、IgG及总抗体

摘要

目的建立快速免疫层析法检测恙虫病特异性IgM、IgG及总抗体,并对其敏感性和特异性进行评价.方法以胶体金标记纯化的基因工程重组抗原,在玻璃纤维上预包被金标记的纯化抗原(Au-Ag)和鼠IgG,在硝酸纤维素膜上检测线处包被羊抗人μ链、羊抗人IgG或重组抗原;在对照线处包被羊抗鼠IgG,组装成检测试纸.在试纸条的玻璃纤维上加待检血清,再滴加2滴反应液.观察金标抗原释放后NC膜上检测线和对照线的反应情况,检测线和对照线同时出现红色条带判为阳性,仅对照线出现红色条带判为阴性,对照线未出现条带为无效试验.结果间接免疫荧光法IFA检测IgG和金标免疫层析法检测IgM、IgG、总抗体的敏感性分别为88.1%,92.3%,90.9%和98.6%;特异性分别为96.0%,94.7%,94.7%和93.3%.结论金标免疫层析法可替代传统方法用于检测恙虫病东方体特异性抗体.