随机肽库筛选弓形虫特异性抗原表位诱导保护性免疫的研究

摘要

目的从噬菌体随机肽库中筛选出模拟弓形虫特异性抗原表位的短肽分子,并探讨其对弓形虫的保护性效果.方法以纯化的弓形虫免疫兔血清IgG为配基,亲和筛选法富集特异性噬菌体,随机挑取噬菌体克隆用夹心ELISA法和Dot-ELISA法检测其特异性,混合4个阳性克隆免疫小鼠,1月后攻击感染,观察小鼠发病时间和死亡时间.结果经3轮筛选,特异性噬菌体得到了有效富集,第3轮洗脱噬菌体的产量为第1轮的167倍,随机挑取27个噬菌体经Dot-Bloting和夹心ELISA法检测,有24个能与弓形虫免疫兔血清及单克隆抗体特异反应.用致死量弓形虫攻击感染经阳性克隆免疫的小鼠,存活时间明显长于对照组.结论免疫筛选噬菌体随机多肽库可获得具有保护性的弓形虫抗原表位,为弓形虫疫苗研制提供了新途径.