卡氏肺孢子虫PCR方法敏感性研究

摘要

目的从3种PCR方法中选择出一种检测卡氏肺孢子虫(Pc)敏感性最高的PCR方法,供以后的实验中应用.方法 Wistar大鼠30只,皮下注射地塞米松,每周二次,制备PCP动物模型,8周后全部剖杀:作大鼠肺印片,六亚甲基四胺银染色.各鼠取肺组织0.2g,均浆后提取DNA,用三种PCR方法作PCR试验.选取六亚甲基四胺银染色和三种PCR检测均为阳性的大鼠DNA标本20份,对每份标本作对倍稀释:1/2、1/4、1/8、1/16......至1/2048,同时用三种PCR方法做扩增试验直到某一稀释度时PCR试验阴性为止,选择出最为敏感的一组PCR方法,并做统计学分析.结果三种方法最低稀释度的均数:DHFR-PCT为1/78.79±1.74;TS-PCR为1/43.71±2.07;MT-PCR为1/1097.5±1.36.结论三种检测Pc的PCR方法中以MT-PCR方法最为敏感.