结核分枝杆菌RpfA融合蛋白的免疫学和生物学特性的初步研究

摘要

目的 在大肠杆菌中表达并纯化结核分枝杆菌RpfA融合蛋白,并初步研究其免疫学和生物学特性.方法 RpfA融合蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测免疫小鼠的体液免疫应答效果.分离小鼠的脾淋巴细胞, MTT法检测淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测培养液上清IFN-γ,IL-2含量;MTB H37Rv毒株静脉感染免疫小鼠,测定脾脏细菌负荷.将不同浓度的复性RpfA融合蛋白和特异性多抗加入到MTB H37Ra中,测定H37Ra的生长曲线.结果 RpfA融合蛋白免疫小鼠的脾淋巴细胞的增殖指数达到3.57,高于生理盐水对照组的1.27(P《0.05);培养上清中IFN-γ含量为362.99±72.75 ng/L,IL-2含量为210.10±20.19 ng/ L,而生理盐水对照组含量均低于50 ng/L(P《0.05).免疫小鼠脾脏细菌负荷计数为5.57±0.37(log10CFU±S),而生理盐水对照组为6.54±0.22(P《0.05).RpfA融合蛋白对H37Ra的生长有明显促进作用,而加入特异性多抗后可以抑制RpfA融合蛋白的促生长作用.结论 RpfA融合蛋白免疫小鼠可引起体液免疫和保护性细胞免疫,可能作为基因疫苗的候选组分.RpfA融合蛋白对H37Ra生长有明显的刺激作用,可能作为快速培养检验结核分枝杆菌的添加组分.