细粒棘球绦虫Eg95重组非分泌型和分泌型分枝杆菌疫苗的构建

摘要

目的 分别构建细粒棘球绦虫Eg95重组非分泌型和分泌型卡介苗及耻垢分枝杆菌疫苗.方法 分别以卡介苗(BCG)基因组DNA和PGEX-4T-Eg95为模板,PCR扩增获120bp的BCG抗原85B信号肽序列和423bp的Eg95基因序列.先将Eg95基因序列定向克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭质粒pMV261,构建非分泌型重组质粒pMEg95.再将BCG-Ag85B信号肽序列定向克隆至pMEg95,构建分泌型重组质粒pSMEg95.电穿孔法将两型重组质粒分别导入BCG菌及耻垢分枝杆菌.结果 双酶切、PCR扩增及测序鉴定证实,克隆基因EG95序列和AG85B信号肽序列正确插入载体PMV261,细粒棘球绦虫EG95重组非分泌型和分泌型分枝杆菌疫苗构建成功.结论 构建了含有Eg95基因序列和BCG-Ag85B信号肽序列的细粒棘球绦虫Eg95重组非分泌型和分泌型分枝杆菌疫苗.