鉴定单增李斯特菌四个进化家系及两个亚系的多PCR方法的建立

摘要

目的 利用多重PCR(multiplex PCR)技术,建立针对单增李斯特菌4个进化家系(Lineage Ⅰ、LineageⅡ、Lineage Ⅲ、LineageⅣ)及2个亚系(LineageⅢA、LineageⅢC)的鉴定方法.方法 以InlA、Lmo0733 、Lmo0038、Lmo0735和LmaA作为靶基因设计引物,建立同时鉴别Lineage Ⅰ 、LineageⅡ、LineageⅢA、LineageⅢC和LineageⅣ菌株的多重PCR反应体系,并对387株单增李斯特菌进行了所属进化家系及亚系的鉴定.结果 387株单增李斯特菌可用本方法进行所属家系和亚系的分型,包括Lineage Ⅰ 246株、LineageⅡ123株、LineageⅢA4株、LineageⅢC 13株和LineageⅣ1株.结论 本方法能准确鉴定单增李斯特菌的4个进化家系及2个亚系的菌株,可用于食品、临床标本中单增李斯特菌的病原学诊断和疫情暴发时的溯源调查.