UFLC-MS/MS法同时测定枳实中6个活性成分的含量

摘要

为了建立超快速液相色谱-串联质谱法同时测定枳实中6个活性成分(异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素和橙皮素)的含量,采用Shim-Pack XR-ODS柱(75mm×3.0mm,2.2 μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～ 10 min,10％→30％B;10～12 min,30％→60％B;12～15 min,60％→85％B),平衡时间为3 min,流速为0.5mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL.质谱采用3200 QTRAP三重四极杆串联质谱仪,离子源为电喷雾电离源(ESI源),检测方式为负离子检测,扫描模式为多重反应检测(MRM).结果 显示,异柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柚皮素和橙皮素浓度分别在0.2～8.0 μg/mL(r =0.999 2)、1.0～ 40 μg/mL(r=0.999 4)、0.2～8.0 μg/mL(r=0.999 7)、0.5～20μg/mL(r =0.999 2)、0.02～0.8μg/mL(r=0.999 7)和0.02～0.8μg/mL(r=0.999 7)浓度范围内与峰面积呈现良好的线性关系;平均回收率(n=9)分别为99.2％、98.7％、98.6％、98.8％、99.3％和99.1％.6批枳实样品测定结果显示:异柚皮苷1.70％～ 1.97％,柚皮苷11.6％～ 12.4％,橙皮苷0.481％ ～0.576％,新橙皮苷3.15％～4.13％,柚皮素0.293％ ～0.391％和橙皮素0.363％ ～0.395％.表明该方法快速、准确、重复性好,可用于枳实的质量控制,同时为新兽药开发利用提供参考.