猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp9基因的克隆与原核表达

摘要

通过PCR方法从重组质粒pSK-B2扩增得到非结构蛋白Nsp9的基因片段.将基因克隆至原核表达载体pET-28a(+),得到重组表达载体pET-28-Nsp9,转化Escherichia coli BL21(DE3)细胞.经IPTG诱导,Nsp9蛋白以包涵体形式表达,SDS-PAGE分析表明重组蛋白的分子量约为27.3 kD,表达量占菌体蛋白的43.2%.Western-Blotting结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别.表达的重组蛋白为进一步研究PRRSV的免疫特性和分子生物学功能奠定了基础.