鸭疫里默氏菌OmpA与鸭IL-2融合基因的克隆与原核表达

摘要

以鸭疫里默氏菌吉林分离株JL-RA1OmpA基因(登录号HQ707077)和鸭DuIL-2成熟片段基因(登录号AY193713)为模板,分别设计带有linker的特异性引物,PCR扩增出序列大小为1 182bp的OmpA-linker基因和序列大小为381bp的linker-DuIL-2成熟蛋白基因.利用SOE-PCR技术,成功构建OmpA-DuIL-2融合基因,片段大小为1551 bp.将其转入大肠杆菌表达载体pET-28a中,构建pET-OmpA-DuIL-2融合表达载体,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE分析得到分子量大小约为61 kDa的融合蛋白,经Western-blot分析该融合基因同时具OmpA和DuIL-2的反应原性.