猪瘟疫苗微载体悬浮培养生产工艺试验

摘要

为优化猪瘟病毒(CSFV)的BT细胞悬浮培养工艺以提高CSFV抗原含量,采用2L生物反应器对BT细胞的最佳接种密度、CSFV的最佳接种剂量进行了摸索和优化,采用优化的工艺参数,进行了BT细胞5倍消化放大工艺验证,同时对比了BT细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺增殖CSFV的差异.结果表明,在3 g/L微载体浓度下,采用1.5 ×105个/mg的细胞初始接种密度,培养72 h可获得最佳细胞密度;采用MOI(感染复数)为0.5的接种剂量可收获≥106.8 FAID50/mL的CSFV抗原;BT细胞从2L到10 L生物反应器的5倍消化放大工艺验证试验,3批细胞培养96 h均能达到4.0×106个/mL以上;悬浮培养工艺增殖的CSFV抗原含量约是转瓶培养工艺的15倍.以上试验为猪瘟疫苗的生物反应器规模化生产奠定了基础.