重组腺相关病毒-胸苷激酶-核糖体插入位点-内皮抑素双靶点基因治疗裸鼠膀胱癌的实验研究

摘要

目的探讨重组腺相关病毒（rAAV）-胸苷激酶（TK）-核糖体插入位点（IRES）-内皮抑素（ES）（简称rAAV-TIE）双靶点基因治疗膀胱癌的动物实验效果。方法膀胱癌T24细胞悬液接种于27只Balb/c裸鼠右侧肩胛区皮下,观察成瘤情况;取已成瘤裸鼠25只,随机分为对照组、rAAV-多克隆位点（MCS）组、rAAV-TK组、rAAV-ES组、rAAV-TIE组,每组5只,瘤内分别注射生理盐水、rAAV-MCS、rAAV-TK、rAAV-ES、rAAV-TIE,4周后颈椎脱臼处死裸鼠,取出移植瘤,HE染色、计算微血管密度（MVD）;采集裸鼠血液标本,双夹心酶联免疫吸附试验检测血清中ES浓度。结果①T24细胞接种3周后,接种部位肿瘤形成25只,成瘤率93%;②瘤内注射rAAV-ES、rAAV-TK、rAAV-TIE 9d后,肿瘤生长明显抑制。治疗4周后rAAV-ES、rAAV-TK、rAAV-TIE、rAAV-MCS和对照组肿瘤体积分别为（0.75±0.08）、（0.71±0.11）、（0.52±0.09）、（1.27±0.13）、（1.24±0.17）cm~3;rAAV-ES组与rAAV-TK组间比较差异无统计学意义,其余组间比较差异均有统计学意义（P值均＜0.05）;③5组裸鼠移植瘤MVD分别为（18.72±2.53）、（21.74±4.62）、（12.73±1.78）、（52.38±6.46）和（49.94±7.17）个/HP,治疗组显著低于空白对照组和空病毒组（P＜0.05）。结论重组rAAV-TIE腺相关病毒被成功构建,体外实验表明rAAV-TIE能抑制膀胱癌的血管生成和肿瘤生长,可有效双靶点基因治疗膀胱肿瘤。