携抗P-选择素单抗靶向超声造影剂的制备及体外寻靶实验研究

摘要

目的制备携抗P-选择素（P selectin）单抗的靶向超声造影剂,并研究其体外寻靶能力。方法采用"亲和素-生物素"桥接法制备携抗P-selectin单抗靶向超声造影剂,检测其基本特性。应用不同剂量重组人白介素4（rhIL-4）和组胺联合刺激人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）表达P-selectin,用免疫荧光检测P-selectin的表达水平并探寻rhIL 4最适刺激剂量。靶向超声造影剂、同型对照超声造影剂和空白超声造影剂分别与经最适剂量rhIL-4和组胺联合刺激的HUVECs和未作处理的HUVECs进行体外寻靶实验。结果成功制备携抗P-selectin单抗靶向超声造影剂,平均粒径为（2.24±0.71）μm,平均Zeta电位为（-2.75±0.84）mV,浓度为（3.0±0.3）×10~9个/ml,抗体结合率高达99.80%;免疫荧光检测结果显示rhIL-4和组胺能成功刺激HUVECs表达P-selectin,并探寻出rhIL-4最适刺激剂量;体外寻靶实验显示靶向超声造影剂能较好地黏附在经最适剂量rhIL-4和组胺联合刺激的HUVECs表面,与其他组比较差异有统计学意义（P＜0.01）。结论采用"亲和素-生物素"桥接法成功制备携抗P-selectin单抗靶向超声造影剂,该造影剂在体外能有效地黏附在经rhIL-4和组胺联合刺激的HUVECs表面。