文心兰ACC氧化酶基因OnACO1克隆与表达分析

摘要

以文心兰切花品种“黄金2号”(Oncidium Gower Ramsey ‘Gold2’)为材料,通过RT-PCR和RACE技术,从文心兰的花中分离得到了1个A CO基因成员的cDNA,命名为OnA CO1 (GeneBank登录号为JQ822088).该基因全长为1 424 bp,包括972 bp的ORF,172 bp的5’-UTR和280 bp的3'-UTR,编码324个氨基酸,其氨基酸序列与石斛兰等兰科植物的ACO氨基酸序列有较高的同源性.构建原核表达载体pGEX-OnACO1,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,在SDS-PAGE中显示出了特异性表达条带,与预测的蛋白大小一致.荧光定量PCR分析表明OnA CO1基因的表达具有组织特异性,主要在蕊柱中表达,并且乙烯对该基因的表达有上调作用.