关节软骨修复细胞基因治疗中软骨细胞支架载体特点

摘要

目的探讨四种不同类型三维支架中培养的关节软骨细胞活性状况及其转基因特性。方法原代培养兔膝关节软骨细胞,并且以表达绿色荧光蛋白（GFP）和萤火虫荧光素酶（GL3）的腺病毒载体AdGFP和AdGL3进行感染。在Ⅰ型胶原海绵、纤维蛋白胶、透明质酸和聚乳酸四种类型的支架材料中,以荧光显微镜和荧光素酶分析法检测细胞的活性状况及其转基因特性;以阿辛蓝染色评价软骨基质的产生。结果表达绿色荧光蛋白的腺病毒（AdGFP）成功感染兔关节软骨细胞,并且持续表达绿色荧光蛋白。被感染的软骨细胞在所有被测试的细胞支架上均能存活,并能表达GFP和荧光素酶报告基因。与其余三种支架比较,聚乳酸支架中转基因表达率最高（P＜0.01）。而且聚乳酸培养体系中,4周时可以检测到阿辛蓝染色阳性的基质材料。结论在关节软骨修复的细胞基因治疗领域,聚乳酸可能是一种合适的支架材料。