脂肪干细胞组织工程软骨修复关节软骨的初步实验研究——人脂肪干细胞体外培养及向软骨细胞诱导分化的实验研究

摘要

目的：观察人脂肪基质干细胞（adipose derived stem cells，ADSCs）体外分离培养及成脂、成软骨诱导分化的生物学性状，探讨其作为软骨组织工程种子细胞的可行性。　　 方法： ①人脂肪组织来源于健康成年女性腹部吸脂术，酶消化法分离出ADSCs，体外培养扩增。 ②取第3代ADSCs，测细胞生长曲线，流式细胞仪测原代细胞表面标记；成脂和成软骨诱导分化。 ③倒置显微镜观察，油红“O”、AB-PAS（阿尔辛蓝-过碘酸）染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色检测分化情况：逆转录一聚合酶链式反应（RT-PCR）检测相关标志基因表达。　　 结果： ①体外培养的ADSCs细胞形态均一，传代稳定。 ②经成脂诱导，细胞内出现空泡，油红“O”染色呈红色，RT-PCR检测到有Leptin、PPAR-γ表达：经成软骨导，AB-PAS染色呈紫红色，Ⅱ型胶原免疫荧光染色胞浆呈强阳性，RT-PCR检测COLLⅡ、SOX9、aggrecan表达。　　 结论：脂肪干细胞能向软骨细胞方向诱导分化，可作为软骨组织工程种子细胞。

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英文文摘

论文说明:本文主要缩略词表

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前 言

第一章 文献综述

第二章 材料与方法

第三章 结果

第四章 讨论

结 论

致 谢

参考文献

作者简介、硕士在读期间发表论文清单