凉血化瘀方对肝衰竭小鼠肝细胞凋亡和相关基因作用机制的初步研究

摘要

目的:研究凉血化瘀方对内毒素脂多糖(Lipoplysaccaride,LPS)诱导的肝细胞凋亡的干预效应,以及对半胱天冬酶-3(caspase-3)mRNA、Fas相关死亡区蛋白(FADD)mRNA表达的影响,探讨凉血化瘀方防治肝衰竭的作用机制.方法:腹腔注射LPS于D-氨基半乳糖(D-galactosamine,GalN)致敏的小鼠,造成暴发性肝衰竭模型,用脱氧核苷酸转移酶介导的缺口原位末端标记技术(TUNEL法)、HE染色观察肝细胞凋亡和病理损伤情况及药物的干预作用.用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析caspase-3mRNA、FADDmRNA表达情况,同时观察药物的作用.结果:造模6小时模型组有大量凋亡阳性细胞表达,治疗组则明显减少(P＜0.01).至24小时肝细胞损害以坏死为主,其程度与细胞凋亡相一致.造模3小时肝细胞caspase-3 mRNA明显表达,治疗组83%,模型组141%,6小时两组表达水平相近.FADD mRNA表达在造模3小时模型组和治疗组肝组织中分别为110%、100%,至6小时模型组的表达增加(124%)而治疗组的表达下调(81%).结论:凉血化瘀方能延缓内毒素肝损伤肝细胞caspase-3 mRNA表达和下调FADDmRNA表达并抑制其凋亡效应.凉血化瘀方对肝衰竭的治疗作用可能与其阻断LPS诱导的肝细胞凋亡信号转导,从而抑制肝细胞凋亡有关.