五首活血化瘀方治疗血瘀证作用机制及疗效对比研究

摘要

目的对比五首活血化瘀方治疗血瘀证的疗效及作用机制。方法(1)应用网络药理学方法揭示丹参饮(DSY)、活络效灵丹(HLXLD)、失笑散(SXS)、桃红四物汤(THSWT)及血府逐瘀汤(XFZYT)治疗血瘀证的作用靶点差异。应用中医药系统药理学数据库、上海有机化学数据库、中医药整合数据库检索五首方药物成分,利用Swiss Target Prediction数据库和STITCH数据库挖掘药物靶点,利用PharmGKB、Online Mendelian Inheritance in Man database(OMIM)、Genetic Association Database(GAD)以及Therapeutic Target Database(TTD)检索血瘀证疾病靶点。通过PPI网络扩增及拓扑参数分析,筛选五首方核心靶点,KEGG富集分析挖掘五首方治疗血瘀证的作用机制差异。(2)动物实验观察五首活血化瘀方治疗血瘀证疗效差异。70只新西兰兔应用高脂饲喂联合肾上腺素皮下注射构建兔血瘀证模型,随机分为对照组(Control)、模型组(Model)、丹参饮组(DSY)、活络效灵丹组(HLXLD)、失笑散组(SXS)、桃红四物汤组(THSWT)及血府逐瘀汤组(XFZYT),各给药组灌胃相应中药汤剂[DSY:3.92 g/(kg·d),XFZYT:7.10 g/(kg·d),SXS:1.12 g/(kg·d),HLXLD:5.60 g/(kg·d),THSWT:4.48 g/(kg·d)],检测各组血脂、血液流变学及主动脉病理学改变。结果(1)DSY、HLXLD、SXS、THSWT和XFZYT分别拥有269、358、388、370和376个作用靶点,其中232个靶点是相同的。“流体切应力及动脉粥样硬化”是五首方共同作用的生物过程。此外,HLXLD、SXS、DSY和THSWT可以影响脂质分解,XFZYT、HLXLD、SXS和THSWT可以调控AGE-RAGE信号通路及凝血反应,HLXLD、SXS和XFZYT可以调控HIF-1信号通路,DSY可作用于cGMP-PKG信号通路,HLXLD影响血小板活化,SXS调控钙信号通路,XFZYT调控PPAR信号通路。(2)在动物实验中,五首方均可降低兔血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL)、TC/HDL和TG/HDL含量,其中XFZYT、HLXLD、SXS差异具有统计学意义(P<0.05),XFZYT疗效最佳,其次为HLXLD、SXS。XFZYT和HLXLD可显著降低apoB100含量,升高apoA1/apoB100(P<0.05)。XFZYT组红细胞压积(HCT)、血浆黏度(PV)和全血黏度WBV(高切、低切)降低,HLXLD和SXS组HCT降低,DSY和THSWT组WBV降低(P<0.05)。五首方均可不同程度减轻主动脉病理损伤程度,降低斑块灰度值,减小斑块面积,其中XFZYT和HLXLD差异具有统计学意义(P<0.05)。结论调控流体切应力,减轻血管内皮细胞损伤可能是五首活血化瘀方治疗血瘀证共同的作用机制,五首方仍分别具有其特异性的靶点,可作为临床选方的参考。五首方可分别调控血脂和血液流变学的不同指标,减轻血瘀证家兔瘀血状态,改善主动脉斑块,XFZYT和HLXLD的疗效较为显著。