改良型富血小板纤维蛋白复合双相磷酸钙可促进兔骨髓间充质干细胞的活性

摘要

背景:将生长因子加入支架材料能促进体外培养干细胞的增殖及成骨分化,促进骨组织再生.改良型富血小板纤维蛋白中含有多种生长因子,能够促进多种细胞的增殖活性及相关功能蛋白的表达.目的:观察改良型富血小板纤维蛋白、双相磷酸钙单独或联合使用对骨髓间充质干细胞生长状况的影响.方法:将第3代兔骨髓间充质干细胞分4组培养,分别加入基础培养基(空白组)、改良型富血小板纤维蛋白条件培养基(A-PRF组)、双相磷酸钙(BCP组)、改良型富血小板纤维蛋白条件培养基与双相磷酸钙(A-PRF+BCP组).CCK-8法检测细胞增殖活性,甲基罗丹明-鬼笔环肽荧光染色观察细胞黏附情况,定量检测细胞内碱性磷酸酶活性及矿化结节形成情况.结果 与结论:①A-PRF+BCP组培养3,5,7,11,14 d的细胞增殖吸光度值高于其他3组,A-PRF组培养1,3,5d的细胞增殖吸光度值高于BCP组、空白组,BCP组培养7,11,14 d的细胞增殖吸光度值高于A-PRF组、空白组;②甲基罗丹明-鬼笔环肽荧光染色显示,BCP组、A-PRF+BCP组骨髓间充质干细胞黏附在双相磷酸钙材料表面,并且A-PRF+BCP组细胞与微丝数量明显多于BCP组;③培养1,21,28 d的矿化结节合成情况为:A-PRF+BCP组＞BCP组＞A-PRF组＞空白组;④培养5,7,9d的细胞碱性磷酸酶含量为:A-PRF+BCP组＞BCP组＞A-PRF组＞空白组,组间两两比较差异有显著性意义(P＜0.05);⑤结果表明,双相磷酸钙前期促细胞增殖进作用较弱,但其支架作用良好,改良型富血小板纤维蛋白于前期促进细胞增殖作用明显,二者联合使用时对细胞的增殖分化均有良好促进作用.