人骨骼肌源性血管内皮细胞对造血干/祖细胞的体外支持

摘要

背景:人骨骼肌源性血管内皮细胞位于血管壁,共表达肌肉干细胞和血管内皮细胞的标记(CD56+CD34+CD144+CD45-).研究显示,人肌血管内皮细胞与间充质干细胞存在相似性,表达间充质干细胞表面标记物,具有多向分化潜能.目的:建立人肌血管内皮细胞作为滋养层与人脐血CD34+细胞体外培养体系,以培养前后CD34+细胞数量变化、免疫表型及集落形成能力为指标,评估人肌血管内皮细胞对造血干/祖细胞的体外支持效力.方法:实验分3组:①实验组:以人肌血管内皮细胞为滋养层与人脐血CD34+细胞体外共培养;②对照组:以人骨髓间充质干细胞为滋养层与人脐血CD34+细胞体外共培养;③空白对照组:人脐血CD34+细胞单独培养.共培养第1,2,4周分析人脐血CD34+细胞数量、血细胞免疫表型和造血干/祖细胞集落形成能力等指标,第5周时因无细胞存活故不进行检测.结果与结论:①人脐血CD34+细胞数量变化:在1,2,4周时实验组比对照组有所增加,但二者差异均无显著性意义(P>0.05);②流式细胞术分析血细胞免疫表型:只有在第2周时对照组人脐血CD34+细胞CD34+CD33-表达率略高于实验组,差异有显著性意义(P<0.05),其他亚型免疫表型CD45+、CD14+、CD10+/CD19+表达两组之间比较差异无显著性意义(P>0.05);③造血干/祖细胞集落形成能力:在1,2,4周时实验组与对照组造血干/祖细胞集落数量差异无显著性意义(P>0.05);④由于空白对照组无滋养层,人脐血CD34+细胞数量在1周时明显下降,第2周计数无存活,因此未进行血细胞免疫表型及集落分析;⑤结果表明,人肌血管内皮细胞作为滋养层细胞具有与人骨髓间充质干细胞相似的体外造血支持作用.