人骨骼肌源性血管外膜细胞对人脐血CD34+细胞的体外造血支持作用

摘要

背景:研究显示血管外膜细胞是间充质干细胞的前体细胞,其通过细胞接触或旁分泌效应调节造血干细胞的行为并支持造血,人骨骼肌源性血管外膜细胞对造血的支持作用有待于研究。目的:从人骨骼肌中分离培养血管外膜细胞并进行生物学特性鉴定,研究其对脐血CD34^+细胞的体外支持作用。方法:①利用多参数流式细胞术从人骨骼肌中分选表型为CD146^+CD56^-CD34^-CD144^-CD45^-的血管外膜细胞,并对其进行生物学鉴定;②建立以CD146^+人骨骼肌源性血管外膜细胞为滋养层的脐血CD34^+细胞体外培养体系(实验组),以人骨髓间充质干细胞为滋养层的脐血CD34^+细胞体外培养体系为阳性对照组,共培养1,2,4周检测培养体系的细胞数量、集落形成能力及免疫表型并进行统计分析。结果与结论:①通过多参数流式细胞术分选出CD146+人骨骼肌源性血管外膜细胞,回测纯度为(91.5±1.85)%(n=5);其表达间充质干细胞表面抗原CD73、CD90、CD105、CD44,不表达造血细胞及内皮细胞表面抗原CD45、CD34、CD31;经诱导培养可向骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及肌细胞分化;②实验组与阳性对照组相比,在细胞数、集落形成能力及免疫表型方面(CD45^+、CD34^+CD33^-、CD14^+、CD10^+/CD19)差异均无显著性意义(P> 0.05,n=6);无滋养层的空白对照组培养1周时细胞数量明显减少,2周时几乎无细胞存活;③结果表明,CD146^+人骨骼肌源性血管外膜细胞与人骨髓间充质干细胞一样对脐血CD34^+细胞具有体外支持作用。