干预Wnt/β-catenin信号通路对硬皮病模型小鼠皮肤组织纤维化及上皮间质转化的影响

摘要

背景:研究证实,Wnt/β-catenin信号通路在系统性硬化症的发生发展中起着重要作用,然而有关抑制Wnt/β-catenin抑制患者皮损信号是否改善硬皮病的报道较少.目的:探究抑制Wnt/β-catenin信号通路对硬皮病小鼠皮肤组织纤维化及上皮间质转化的影响.方法:选取雌性BALB/c小鼠24只,购自长沙市天勤生物技术有限公司.实验方案经南华大学动物实验伦理委员会批准.随机将24只BALB/c小鼠均分为3组:对照组背部皮下注射生理盐水;模型组和干预组采用背部注射博来霉素500 mg/L建立硬皮病小鼠模型;干预组同时腹腔注射5 mg/kg的IGC-001(Wnt/β-catenin信号通路抑制剂),1次/d,连续注射4周.麻醉后取各组小鼠背部注射区皮肤,采用苏木精-伊红和Masson染色,观察皮损组织病理学变化、胶原纤维分布和真皮厚度;采用水解法检测皮损组织羟脯氨酸含量;Western blot检测皮损组织中β-链蛋白(β-catenin)、Ⅰ型胶原蛋白、纤维链接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、上皮性钙黏附蛋白、波形蛋白和神经性钙黏附蛋白的表达.结果与结论:①博来霉素连续皮下注射4周后,模型组大鼠注射区域真皮层明显增厚、胶原纤维明显增多;干预组真皮层较模型组明显变薄,胶原纤维明显减少;②与对照组比较,模型组皮损组织中羟脯氨酸含量及Ⅰ型胶原蛋白、纤维链接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白、神经性钙黏蛋白和β-链蛋白表达量显著增加(均P<0.05),上皮性钙黏附蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组比较,干预组皮损组织中羟脯氨酸含量及Ⅰ型胶原蛋白、纤维链接蛋白、α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白和神经性钙黏蛋白表达量显著降低(均P<0.05),上皮性钙黏附蛋白表达显著增加(P<0.05),β-链蛋白表达无显著性变化(P>0.05);③结果说明,抑制Wnt/β-catenin信号通路可抑制硬皮病小鼠皮肤组织纤维化,其机制可能与抑制皮肤组织上皮间质转化有关.