成年大鼠脑损伤后神经前体细胞的增殖及迁移(英文)

摘要

背景:成年哺乳类动物中枢神经系统存有神经前体细胞,其基本生物学特性主要包括多向细胞分化和维持自身数量稳定。目的:观察中枢神经系统损伤后神经前体细胞增殖和迁移的反应过程,探讨神经前体细胞在中枢神经系统损伤修复中的作用,设计:随机对照实验。单位:北京市神经外科研究所病理生理研究室。材料:实验在北京市神经外科研究所病理生理研究室完成。选择成年Wistar大鼠67只,随机分为正常对照组7只,损伤后1,3,7,14,30d组,每个损伤组12只。以上每个损伤组再随机分为人工脑脊液组2只,碱性成纤维细胞生长因子组5只和神经营养因子-3组5只。方法:各损伤组制作液压冲击性脑损伤模型,正常对照组仅开颅,不致伤。各损伤组每次腹腔内注射BrdU50mg/kg,处死前2h注入最后一次,其中损伤后1d和3d组每天注入3次,损伤后7d和14d组每天注入1次。碱性成纤维细胞生长因子组每日灌注碱性成纤维细胞生长因子总量360ng,神经营养因子-3组每日灌注神经营养因子-3总量240ng,人工脑脊液组每日灌注液中不含碱性成纤维细胞生长因子和神经营养因子-3,灌注4μL。免疫组织化学方法动态检测各组大鼠脑组织中Nestin和BrdU的表达。BrdU标记方法确定增殖的神经前体细胞;Nestin的表达用于确定神经前体细胞。主要观察指标:Brdu,GFAP+/Brdu+和GFAP-/Brdu+在各组大鼠脑损伤不同时相中的表达。结果:67只大鼠均进入结果分析。①与正常对照组相比较,伤侧皮质、海马及室下区的Nestin阳性细胞数于伤后1d明显增多[(3.1±1.1),0个/视野;(5.5±0.9),(1.3±0.8)个/视野;(8.1±0.9),(2.3±0.8)个/视野,P<0.05],7d达高峰[(7.5±1.2),(10.2±1.5),(13.6±1.2)个/视野],30d消失[0,(1.2±0.9),(2.1±0.8)个/视野]。②伤侧皮质、海马及室下区的BrdU阳性细胞数于伤后3d达高峰[(12.6±1.5),(9.9±1.1),(13.4±1.0)个/视野],而7d以后逐渐减少。③室下区BrdU阳性细胞及Nestin阳性细胞经胼胝体向对侧迁移。结论:液压冲击性脑损伤可激发成年大鼠脑皮质、海马及室下区神经前体细胞增殖及迁移,其中Nestin阳性细胞数于伤后7d最多,BrdU阳性细胞数于伤后3d最多。