常氧与缺氧状态下豚鼠心肌细胞内钙离子浓度与葛根素注射液的干预

摘要

目的:探讨在常氧、缺氧状态下,豚鼠心肌细胞内游离钙离子浓度与葛根素注射液干预的影响,并与硝苯地平的作用相比较.方法:采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注,Ⅰ型胶原酶分离心肌细胞,并调整细胞数为2×109L-1.在细胞外钙含量为2 mmol/L情况下,采用F-2000型荧光分光光度计进行心肌细胞内钙含量测定,计算细胞内游钙离子浓度.将心肌细胞悬液分为6组,分别为常氧及缺氧条件下的对照组、葛根素注射液组、硝苯地平组.在常氧条件下(氧分压=15.9 kPa),观察100 s后,随机选择3组分别加入营养液10μL、葛根素注射液10μL(终浓度:0.1 mmol/L)、硝苯地平10μL(终浓度:20 mmol/L)观察100,200,300,400,500 s.而另外3组在缺氧条件下(氮气:0.1 cm3/s)也分别给予同浓度的上述3种药物后,按上述5个时间点进行观察.采用荧光分光光度计动态测量不同条件下各组心肌细胞内游离钙离子浓度的变化.结果:①在静息(0～100 s)常氧状态(氧分压=15.9 kPa)及控制细胞外细胞内游离钙离子浓度为2 mmol/L(生理情况)时,6组的心肌细胞内游离钙离子浓度无显著差异(P＞0.05),故知6组的组间一致性较好,具有可比性.②心肌细胞内游离钙离子浓度:葛根素注射液组和硝苯地平组给药后100,200,300,400,500 s均明显低于对照组(P＜0.05～0.01).但葛根素注射液组下降速度较硝苯地平组慢(P＜0.05～0.01).③心肌细胞内游离钙离子浓度:缺氧状态下,葛根素注射液组缺氧后100,200,300,400,500 s增加较对照组缓慢(163.7±19.7),(224.2±20.7),(309.7±15.1),(424.7±14.0),(477.5±21.5)nmol/L;(208.8±28.9), (328.5±14.4), (401.8±21.2), (534.3±20.8),(751.4±36.0)nmol/L,P＜0.01].硝苯地平组在缺氧后100,200,300,400,500 s比对照组增加少(P＜0.01),且降低速率较葛根素注射液组高[硝本地平组:(109.4±19.6),(140.8±16.2),(203.1±15.2),(265.4±17.3),(301.7±24.1)nmol/L,P＜0.01].结论:在常氧条件下葛根素注射液使心肌细胞内游离钙离子浓度明显下降;缺氧条件下,葛根素注射液延缓缺氧所引起的心肌细胞内游离钙离子浓度增加,从而阻止心肌细胞内钙超载,对心肌起到保护作用.葛根素注射液的作用与经典的钙通道阻断剂硝苯地平相似,但与硝苯地平比较,具有相对缓慢的抑制缺氧后心肌细胞内游离钙离子浓度升高的特点.