血管内皮生长因子基因诱导脑梗死大鼠热休克蛋白70变化与其梗死体积的关系

摘要

目的:观察血管内皮生长因子165基因治疗大鼠脑梗死前后热休克蛋白70表达的变化,进一步研究热休克蛋白70在脑梗死中的神经保护作用.方法:实验于2003-03/2004-03在郧阳医学院附属太和医院神经科学研究所完成.选择雌性Wistar大鼠40只,常规饲养观察1周后,随机分为正常对照组5只,不造模,余35只造模后分为假手术组5只,单纯梗死组10只,空载质粒对照组10只,血管内皮生长因子基因治疗组10只.采用改进的线栓法制成Wistar大鼠永久性大脑中动脉闭塞模型,空载质粒对照组和血管内皮生长因子基因治疗组用50 μL微量进样器进针约3.5 mm,分别注入5 μL空载质粒和质粒载体与血管内皮生长因子165基因构成的重组DNA到梗死区,7 d后断头取脑.用热休克蛋白70免疫组化染色的方法显示脑中的热休克蛋白70的表达情况;用苏木精-伊红染色显示梗死区,用图像分析仪测定梗死面积.结果:40只大鼠全部进入结果分析.①热休克蛋白70的着色部位在神经细胞的细胞浆和细胞膜,黄褐色细胞即为阳性细胞.②热休克蛋白70的表达:正常对照组与假手术组基本相似[(3.00±0.89)个/高倍视野,(6.31±0.63)个/高倍视野,(P＞0.05)],单纯梗死组与空载质粒对照组基本相似[(23.98±3.25)个/高倍视野,(23.31±2.77)个/高倍视野,(P＞0.05)],单纯梗死组比正常对照组和假手术组明显增加(P＜0.01).血管内皮生长因子基因治疗组均明显高于与各组[(57.60±3.46)个/高倍视野(P均＜0.01)].③血管内皮生长因子基因治疗组梗死体积百分率[(9.52±1.99)%]显著低于单纯梗死组(22 31±4.18)%和空载质粒对照组[(24.48±3.51)%,P＜0.01].空载质粒组与单纯梗死组梗死体积百分率比较基本一致(P＞0.05).结论:血管内皮生长因子基因可诱导热休克蛋白70的表达增高,脑梗死体积百分率降低.说明热休克蛋白70表达增多与脑梗死体积缩小之间有一种正向关系,亦证明其可能是与缺血有关的一种保护性蛋白.