牙齿修复相关转基因研究:显微注射法获得pTet-on-CX转基因工具小鼠G0代的实验观察

摘要

目的:为便于进行规模化的转基因研究,构建一种四环素调控性转基因体系中的工具小鼠系.方法:实验于2002-06/10在上海南方模式生物研究中心完成.以cβ-actin启动子取代pTet-on-NSE质粒中的NSE启动子,构建转基因载体pTet-on-CX;将XhoI酶切线性化的载体DNA注射到小鼠受精卵的雄原核,移植到假孕母鼠的输卵管.仔鼠出生后,经PCR及Southern Blotting检测阳性小鼠.结果:注射的受精卵共存活603枚,移卵后产仔64只,阳性6只.阳性鼠分别传代开始建系.结论:通过显微注射的方法获得pTet-on-CX转基因工具小鼠的G0代,为规模化的转基因研究(包括与牙齿修复有关的基因,如牙本质涎磷蛋白基因)奠定了基础.