用显微注射法制备携带人p16基因的转基因小鼠的初步研究

摘要

目的：用显微注射法制备携带人p16基因的转基因小鼠.方法：将人的p16cDNA亚克隆至PCR3.1,构建成pCR(R)3.1/p16真核表达质粒,对204只近交系615小鼠进行超排卵,收集受精卵,将人p16基因真核表达质粒pCR(R)3.1/p16显微注射到受精卵的原核内.将注射后成活且健康的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管内,使其发育直至分娩.PCR分析检测仔鼠基因组中转基因的整合.结果：显微注射510个受精卵,其中成活且健康的350个,卵的成活率为68.62﹪.将其移植到21只假孕母鼠的输卵管内,其中12只假孕母鼠怀孕,并产仔46只,妊娠受体产仔率为22.4﹪总产仔率13﹪.PCR分析45只仔鼠,PCR结果为阴性.本研究仍在进行中.