人源核不均一核糖核蛋白E1真核表达载体在神经细胞中的表达

摘要

背景：人源核不均一核糖核蛋白E1功能广泛，可参与神经系统骨架蛋白的表达。目的：为深入研究其在神经细胞中的作用，构建其真核表达载体，观察其在神经细胞中的表达。方法：利用真核表达载体pcDNATM4/His C，通过亚克隆构建核不均一核糖核蛋白E1-pcDNATM 4/His C重组质粒，经酶切、测序鉴定，通过转染神经细胞SH-SY5Y，采用western-blot，RT-PCR鉴定核不均一核糖核蛋白E1重组质粒的表达，并观察转染细胞的生长现象。结果与结论：成功构建了核不均一核糖核蛋白 E1的真核表达载体，mRNA 和蛋白水平上均证实了该质粒可在神经细胞SH-SY5Y中正确表达。SH-SY5Y细胞在转染核不均一核糖核蛋白E1后表现为加速生长。提示该蛋白对神经细胞的生长发育具有重要的作用。该载体为进一步研究核不均一核糖核蛋白E1在神经系统中的功能提供了前提条件。