低温制剂保存对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响

摘要

背景：脂肪干细胞在GMP洁净车间制备完成后需要做成制剂才能给患者输注。低温制剂相比于冻存制剂有很多优势，然而关于低温短期保存对干细胞生物学特性影响的研究较少。目的：评价用含5%人血白蛋白的复方电解质低温保存24h对脂肪间充质干细胞生物学特性的影响。方法：取第3-6代人脂肪间充质干细胞，以5×109L-1的细胞浓度重悬在含5%人血白蛋白的复方电解质注射液中，将细胞悬液转移至冻存管中，置于冷链运输箱，2-8℃低温保存24h。观察低温保存前后的细胞形态、贴壁能力、细胞活率、细胞直径及细胞免疫表型变化。结果与结论：①脂肪间充质干细胞低温保存24h后，死细胞增多，细胞活率显著下降，但细胞活率仍大于80%，活细胞直径显著增大；②脂肪间充质干细胞低温保存24h后，少量细胞为圆形，失去贴壁能力，大部分细胞能贴壁生长，形态为梭形，与细胞保存前贴壁形态相似；③脂肪间充质干细胞低温保存24h后，HLA-DR、CD34和CD45均为阴性表达，阳性率低于2%；CD29、CD73和CD105均为阳性表达，阳性率高于95%，但保存后的细胞显著地由一群分为两群，部分细胞体积增大，向右移动；④结果表明，低温制剂保存未明显影响脂肪间充质干细胞的贴壁生长能力、存活率及免疫表型等干性生物学特性。