乳腺癌基质成纤维细胞内Caveolin-1蛋白对表皮生长因子的影响

摘要

背景：Caveolin-1是小窝蛋白中最主要的功能蛋白,参与多种细胞生物学过程,与乳腺癌的发生、发展关系密切。目的：探讨乳腺癌基质成纤维细胞内Caveolin-1蛋白对表皮生长因子的影响。方法：采用siRNA技术干扰成纤维细胞ESF-1内Caveolin-1蛋白的表达,QRT-PCR、Wesren-Blot筛选和验证siRNA的最佳干扰效果,得出最佳沉默模型为ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2。（1）将ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2细胞与乳腺癌BT474细胞共培养（实验组）,以单独培养ESF-1细胞、ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2细胞为对照,培养24,48 h后,QRT-PCR检测ESF-1细胞内表皮生长因子的表达;培养48,72 h后,ELISA检测培养液内表皮生长因子的表达;（2）将ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2（实验组）、ESF-1（对照组）分别与乳腺癌BT474细胞共培养,以单独培养的BT474细胞为空白对照,培养24,48 h后,CKK-8法检测BT474细胞增殖。结果与结论：（1）实验组ESF-1细胞内表皮生长因子mRNA表达高于ESF-1细胞组、ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2细胞组（P〈0.05）,ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2细胞组高于ESF-1细胞组（P〈0.05）;（2）实验组、ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2细胞组培养液内表皮生长因子蛋白表达高于ESF-1细胞组（P〈0.05）,实验组高于ESF-1-Caveolin-1 SiRNA-N.2细胞组（P〈0.05）;（3）培养48 h,实验组、对照组细胞增殖快于空白对照组（P〈0.05）,实验组快于对照组（P〈0.05）;（4）结果表明,干扰Caveolin-1蛋白表达能促进纤维细胞表皮生长因子的表达,且在与乳腺癌细胞共培养条件下,作用更为显著;共培养条件下,干扰成纤维细胞Caveolin-1蛋白表达能促进乳腺癌细胞增殖。