血管内皮生长因子基因修饰羊膜间充质干细胞移植治疗肾病综合征

摘要

背景：外源基因在间充质干细胞中的表达有利于增强其移植效应及提高其分化率。目的：探讨血管内皮生长因子基因修饰羊膜间充质干细胞移植对肾病综合征大鼠肾功能及凝血功能的改善作用。方法：从72只雄性SD大鼠中随机选出18只，作为正常组，未给予任何干预；余下的54只大鼠随机分为模型组、羊膜间充质干细胞组、血管内皮生长因子修饰组，每组18只，均于尾静脉注射阿霉素建立肾病综合征模型。造模后24 h，经尾静脉注射生理盐水、羊膜间充质干细胞悬液、血管内皮生长因子基因修饰羊膜间充质干细胞悬液各10μL，1次/d，连续3d。移植后12周采用全自动生化分析仪检测血脂水平、肾功能指标及凝血指标变化，采用三氯乙酸法测定24 h尿蛋白含量，采用RT-PCR、Western blot检测大鼠肾组织HPA及VEGF mRNA和蛋白的表达。结果与结论：①模型组24 h尿蛋白定量及血清总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、肌酐、尿素氮水平与正常组比较均明显升高(P<0.05)，血清总蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白水平则明显降低(P<0.01)。羊膜间充质干细胞组及血管内皮生长因子修饰组上述各指标均较模型组明显改善(P<0.05)。血管内皮生长因子修饰组各项指标优于羊膜间充质干细胞组，差异有显著性意义(P<0.05)；②模型组各凝血指标呈高凝趋势，与模型组比较，羊膜间充质干细胞组、血管内皮生长因子修饰组高凝状况均有改善，血管内皮生长因子修饰组更为明显；③模型组HPA mRNA和蛋白表达较正常组明显增加，羊膜间充质干细胞组、血管内皮生长因子修饰组HPA mRNA和蛋白表达较模型组减少，血管内皮生长因子修饰组HPA mRNA和蛋白表达量最少；④血管内皮生长因子修饰组血管内皮生长因子mRNA和蛋白表达量明显高于其他3组，组间比较差异均有显著性意义(P<0.05)；⑤结果表明，血管内皮生长因子基因修饰羊膜间充质干细胞能够改善肾病综合征大鼠的肾功能及血液高凝状态。