单细胞拉曼光谱研究游离脂肪酸对NIT-1胰岛β细胞生理的影响

摘要

运用激光镊子拉曼光谱技术探讨高浓度游离脂肪酸对NIT-1胰岛β细胞生理的影响.实验组细胞以含0.25mmol/L棕榈酸培养12,24,48h,平行对照组中不含任何脂肪酸.通过扫描形式收集各组细胞的拉曼光谱后,使用Hoechs33342/PI荧光染色保留活细胞的光谱,并在OriginPro 8.0系统中比较各组平均光谱的差异.结果显示对照组间的拉曼光谱无明显差异;高脂组光谱在780、1124、1092cm<'-1>及1172cm<'-1>发生拉曼位移,且780、1172、855cm<'-1>及873cm<'-1>峰值强度降低.这些变化的光谱峰在分子归属上指认为细胞内DNA和蛋白质.由此推断高浓度游离脂肪诱导NIT-1细胞损伤在光谱表现为细胞内DNA及蛋白质的结构、含量改变,且该变化与细胞的凋亡有着密切联系.在实验中激光光镊拉曼系统对观察细胞早期损伤有着积极作用.