基于TaqMan探针的Real-time PCR定量检测空肠弯曲杆菌

摘要

空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni,C.jijuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一.由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viable but nonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果并不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作.核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便.在本文基于Light Cycler为平台,建立一种基于TaqMan探针的Real-time PCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌.用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性.整个检测过程60 min内可以完成,检测限度为5 CFU,标准曲线的相关系数为0.988.结果表明荧光定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法.