猪传染性胃肠炎病毒S基因转基因玉米植株的构建及鉴定

摘要

为构建猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因转玉米植株,本研究以玉米自交系"丹598"和"H99"的胚性愈伤组织为材料,通过愈伤组织对卡那霉素的敏感性试验,确定了卡那霉素40 mg/L～56 mg/L为愈伤组织适宜选择压.利用农杆菌介导法将TGEV S基因导入玉米自交系中,并对农杆菌转化系统的条件进行了优化.结果表明,根癌农杆菌EHA105的菌液OD600nm值为0.5～0.6时,侵染20 min为农杆菌转化的最适条件.并对转化的愈伤组织进行分化诱导出苗后进行PCR和Southern blot检测,证明外源目的基因已整合到玉米基因组中.