猪乳汁中抗猪传染性胃肠炎病毒IgA抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要

为建立检测猪乳汁中抗猪染性胃肠炎病-毒-(TGEV) IgA抗体的间接ELISA方法,本研究以TGEV重组N蛋白为包被抗原,以辣根过氧化物酶标记羊抗猪IgA为检测抗体,并采用方阵法确定包被抗原和待检乳汁的最佳工作浓度,对各种反应条件进行优化,建立了猪乳汁中TGEVIgA抗体的间接ELISA检测方法.该方法检测稀释160倍的阳性乳清仍呈阳性;与猪流行腹泻和猪轮状病毒感染阳性乳清无交叉反应;批内和批间变异系数均小于10％.利用建立的ELISA方法与间接免疫荧光方法分别对134份临床样品进行检测,阳性检出率分别为58.2％(78/134)和59.7％(80/134),总符合率为85.6％.本研究建立的检测方法能够有效评估乳汁中TGEVIgA抗体的水平.