血红蛋白β亚基对猪流行性腹泻病毒增殖抑制作用的研究

摘要

本实验室前期蛋白质组学研究结果显示,猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染非洲绿猴肾细胞(Vero-E6)后,导致血红蛋白β亚基(HBB)的表达量升高.为进一步从蛋白水平验证前期的实验结果并研究HBB对PEDV增殖作用的影响,本研究将PEDV感染Vero-E6细胞,感染24 h后经western blot检测结果表明,PEDV感染能够促进HBB的表达.进一步采用RT-PCR从Vero-E6细胞总RNA中扩增HBB基因并将其克隆至真核表达载体pCAGGS中,构建HBB真核表达重组质粒pCAGGS-HBB,并将其转染至Vero-E6细胞.经western blot检测结果表明,HBB在Vero-E6细胞中获得高效表达.在HBB过表达后感染PEDV,经western blot、TCID50及荧光定量PCR检测结果表明,过表达HBB能够显著抑制PEDV的增殖.本研究对于进一步阐明HBB对PEDV增殖作用的影响机制提供了实验依据.