中山病多克隆抗体竞争ELISA检测方法的建立

摘要

为建立一种简便、快速的中山病血清抗体监测方法,本研究采用纯化的中山病病毒(CHUV)包被ELISA反应板,兔抗CHUV多克隆抗体作为竞争抗体,建立了检测CHUV抗体的竞争ELISA (C-ELISA)方法.结果显示:抗原最佳包被浓度为4.12 μg/mL,竞争抗体最佳使用浓度为1∶12 000倍.特异性试验显示该C-ELISA方法仅能检测CHUV抗体,其它相关病毒阳性血清检测结果均为阴性.对已知阳性样品的检测结果表明,本研究建立的C-ELISA方法敏感性高于血清中和试验和琼脂扩散试验.分别用C-ELISA、RT-PCR和病毒分离试验对监控动物每周采集的血清和抗凝血样品进行检测,ELISA结果与其它两种方法检测结果对应一致.本研究建立的C-ELISA为CHUV抗体的检测提供了一种快速、方便、可靠的方法.