温石棉诱发人胚肺细胞恶性转化中端粒酶的作用

摘要

目的研究端粒酶在石棉诱发人胚肺成纤维细胞恶性转化中的作用.方法将端粒酶基因功能片段(hTERT)导入人胚肺成纤维细胞(HELF)中.选用2.5 μg/cm2温石棉粉尘分别对导入和未导入hTERT的HELF进行染毒,分离转化灶,观察细胞生物性状,测定细胞生长曲线、端粒酶活性和端粒长度,进行软琼脂集落形成实验,判定转化性质.结果将hTERT成功导入HELF,建立了导入端粒酶功能片段的人胚肺成纤维细胞系(HELF-T+).HELF和HELF-T+被石棉刺激后均发生了恶性转化,HELF-T+恶性转化率为(2.08±1.08)转化灶/皿,显著高于HELF染毒组的恶性转化率[(1.08±0.10)转化灶/皿].恶性转化的细胞和HELF-T+均具有较高的端粒酶活性和较长的端粒长度.结论端粒酶活性较高、端粒长度较长的细胞,经石棉刺激后恶性转化率也较高,表明端粒酶在石棉诱导细胞发生恶性转化的过程中发挥了重要作用.