宿主T淋巴细胞对以脱落乳牙干细胞为基础的骨组织再生能力影响研究

摘要

目的 研究宿主T淋巴细胞对以脱落乳牙干细胞(stem cells from exfoliated deciduous teeth,SHED)为基础的骨组织再生能力的影响以及可能的机制,为揭示宿主免疫微环境在组织再生过程中的作用及机制奠定基础.方法 原代分离培养人SHED和小鼠脾脏来源CD4+T淋巴细胞.将SHED与羟基磷灰石支架材料(HA/TCP)复合后种植于裸鼠背部皮下.实验组术前2d,经尾静脉系统性回输小鼠CD4+T细胞,以回输PBS的裸鼠作为对照组.分别于术后2、5、14d收取标本,对SHED细胞种植复合物中促炎症细胞因子水平进行检测;术后8周收取标本,制备组织学切片进行HE染色观察.采用SPSS20.0软件对两组的检测数据进行统计学分析.结果 原代SHED细胞形态呈梭形,表达间充质干细胞表面标记物CD73、CD90、CD105、CD146,体外诱导培养具有成骨、成脂向分化潜能.免疫磁珠分选CD4+T淋巴细胞纯度达95.7％.与对照组相比,实验组细胞种植复合物中促炎症细胞因子干扰素-γ(interferon-y,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α.(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-17(interleukin-17,IL-17)表达水平显著升高(均P＜0.05),其中IFN-γ变化较为明显,在术后5d表达水平达峰值.细胞种植复合物种植术后8周,实验组SHED种植复合物新生骨组织面积显著降低(P＜0.05).结论 宿主T淋巴细胞明显抑制以SHED为基础的骨组织再生,且与促炎症细胞因子的分泌水平有关,其中IFN-γ可能在宿主T淋巴细胞抑制骨组织再生中发挥重要作用.