骨髓基质干细胞静脉移植治疗大鼠脊髓损伤模型后Bcl-2、Bax的表达

摘要

目的 通过静脉移植绿色荧光蛋白转基因小鼠骨髓基质干细胞治疗大鼠脊髓挫伤模型,研究骨髓基质干细胞的移植对Bcl-2、Bax表达变化的影响,探讨静脉移植骨髓基质干细胞治疗脊髓损伤的可行性.方法 SD成年雌性大鼠,随机分成正常组、对照组、静脉移植组(后2组再分为术后1、3、7、14、21、28d组).用自制改良的Allen 装置使不锈钢杆自由落下,造成T12脊髓节段挫裂伤.在术前及术后对大鼠进行BBB评分和爬网格试验.术后第2d移植绿色荧光蛋白转基因小鼠的MSCs.之后,分别于1、3、7、14、21、28d取损伤(T12脊髓节段)节段上下约3cm固定,制作15～20μm厚的连续冰冻切片,每隔5片取一片组织进行荧光细胞观察及Bcl-2、Bax抗体免疫组织化学ABC染色.在荧光显微镜下观察细胞移植组灾光细胞,在Olympus光学显微镜下对脊髓灰质前角进行阳性细胞计数,利用HPLAS-1000高清晰图文分析系统检测Bcl-2、Bax免疫阳性反应物的平均灰度值.应用SPSS11.0软件包进行组间多个样本均数比较的单因素方差分析、q检验.结果 在正常组脊髓灰质的前角可见Bcl-2、Bax阳性神经元的表达,Bcl-2免疫阳性产物主要定位于核膜中.Bax主要分布于位于神经元胞浆中.Bcl-2和Bax阳性细胞伤后7d达高峰,随后开始下降.细胞移植后该规律不变.对照组Bcl-2阳性神经元表达与各移植组比较有显著性差异(P＜0.05).结论 与损伤对照组相比细胞移植治疗组7、14d组Bcl-2阳性细胞数上升、Bax阳性细胞数下降,灰度值升高2组间有显著性差异,说明移植骨髓基质干细胞下调,7d及14d组Bax而上调Bcl-2的表达.