腺病毒介导hBDNF基因修饰骨髓间充质干细胞静脉移植对大鼠脊髓损伤后OMgp表达的影响及意义

摘要

目的 探究人脑源性神经营养因子(hBDNF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)静脉移植治疗大鼠脊髓损伤(SCI)后对少突胶质细胞髓鞘糖蛋白表达(OMgp)的影响及意义.方法 构建表达hBDNF全长的并以绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标志基因的5型复制缺陷型重组腺病毒载体(Ad5-hBDNF-EGFP),分离大鼠BMSCs并培养扩增,转染Ad5-hBDNF-EG-FP及EGFP空白载体,观察细胞荧光表达情况,Western印迹法检测细胞hBDNF表达水平.将18只SD大鼠随机分为A、B、C组,A组进行静脉移植hBDNF-EGFP-BMSCs,B组进行静脉移植空白载体-EGFP-BMSCs,C组不进行BMSCs移植,3组均采用改良Allen重物打击法制作T10节段脊髓损伤模型.观察大鼠建模后24 h及1、3、5 w脊髓损伤的行为学(BBB)评分及第5周皮层体感诱发电位(CESP),Western印迹法检测第5周大鼠损伤区脊髓hBDNF、OMgp蛋白表达.结果 hBDNF-EGFP-BMSCs中hBDNF表达水平显著高于空白载体-EGFP-BMSCs(P<0.05),且细胞呈现较强绿色荧光表达.A、B组3、5 w时BBB评分显著高于C组(P<0.05),且第5周时A组显著高于B组(P<0.05).第5周,A、B组CSEP潜伏期缩短及峰值增加较C组明显(P<0.05),且A组增加较B组明显(P<0.05);A组损伤区脊髓组织hBDNF表达显著高于B、C组(P<0.05);A组OMgp表达显著低于B、C组,且B组显著低于C组(P<0.05).结论 静脉移植hBDNF-EGFP-BMSCs可通过抑制OMgp的表达促进损伤脊髓结构修复及功能重建,是SCI有效的治疗手段.