桔梗皂苷D通过介导PI3K/Akt/mTOR信号通路调节氧化应激改善糖尿病肾病模型大鼠肾损伤

摘要

目的 研究桔梗皂苷D改善糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤作用及机制。方法 采用高脂饮食联合腹腔注射链尿佐菌素60 mg·kg^(-1)的方法制备DN大鼠模型,以大鼠血糖≥16.7 mmol·L^(-1)、24 h尿蛋白含量>30 mg视为造模成功。模型动物分为模型组,模型+桔梗皂苷D 25,50和100 mg·kg^(-1)(ig)及模型+二甲双胍500 mg·kg^(-1)(ig),持续14 d,同时设正常对照组。血糖仪检测血糖;糖化血红蛋白(HbA1c)检测仪检测HbA1c;尿蛋白定量试剂盒检测24 h尿蛋白含量;HE染色检测肾组织病理损伤;试剂盒检测肾组织中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;ELISA检测肾组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β水平;Western印迹法检测肾组织中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白磷酸水平。结果 与正常对照组比较,模型组血糖、HbA1c水平和尿蛋白含量显著升高(P<0.05),肾组织坏死明显,肾小球萎缩,肾小管上皮细胞大量变性,并可见大量炎症细胞,TC,TG和LDL-C水平升高(P<0.05),HDL-C水平降低(P<0.05),TNF-α,IL-6和IL-1β水平升高(P<0.05),MDA含量升高(P<0.05),SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05),PI3K,Akt和mTOR蛋白磷酸化水平升高(P<0.05)。与模型组比较,模型+桔梗皂苷D 50和100 mg·kg^(-1)组及模型+二甲双胍500 mg·kg^(-1)组血糖、HbA1c水平和尿蛋白含量显著降低(P<0.05),肾小球基底膜增厚程度明显改善,肾小球系膜基质增生程度明显减轻,TC,TG和LDL-C水平显著降低(P<0.05),HDL-C水平升高(P<0.05),TNF-α,IL-6和IL-1β水平降低(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05),PI3K,Akt和m TOR蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。结论 桔梗皂苷D可通过介导PI3K/Akt/m TOR信号通路调节氧化应激,从而改善DN模型大鼠肾损伤。