肌肽对高糖诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用

摘要

目的 探讨肌肽对高糖诱导的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞凋亡的保护作用及其机制.方法 SH-SY5Y细胞用含葡萄糖50 mmol·L-1的高糖培养液和肌肽0.6,3和15 mmol· L-1的培养液培养48 h,相差显微镜下观察细胞形态的变化;MTT比色法测定细胞存活率;Hoechst33258染色观察细胞核形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;CDFH-DA探针法检测细胞中活性氧(ROS)的水平,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)的含量.结果 与正常组(低糖培养基)相比,高糖组细胞存活率明显降低(P ＜0.01);Hoechst33258染色发现细胞核固缩裂解,呈凋亡特征性改变;细胞凋亡率、细胞中ROS的水平、上清液中8-OHdG的分泌量明显升高(P＜0.01).与高糖组相比,肌肽0.6,3和15 mmol·L-1组细胞存活率明显升高(P＜0.01);Hoechst33258染色发现细胞核核固缩裂解减少,形态明显改善;细胞凋亡率分别降低至(20.65±1.13)％,(14.95±0.64)％和(9.95±0.61)％(P＜0.01);细胞中ROS的水平分别降低至(182±16)％,(168±15)％和(140±10)％(P＜0.05);上清液中8-OHdG的分泌量均明显降低,分别为2.780 ±0.154,2.136 ±0.100和(1.864 ±0.151)μg·L-1(P＜0.01).单纯肌肽组的细胞存活率、细胞核形态以及细胞凋亡率与正常组相比无显著差异,细胞中ROS水平和上清液中8-OHdG的分泌量均有所降低,分别为(88±9)％和(0.380 ±0.023)μg·L-1(P＜0.05).甘露醇组的各项指标与正常组相比无显著差异.结论 肌肽对高糖诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与肌肽的抗氧化作用有关.