阿替洛尔的手性衍生化RP-HPLC法拆分及在鼠肝微粒体中的测定

摘要

目的:建立阿替洛尔两对映体在鼠肝微粒体中的RP-HPLC测定方法.方法:从鼠肝微粒体中提取阿替洛尔消旋体,采用手性衍生化试剂2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)对阿替洛尔消旋体进行柱前手性衍生化再以RP-HPLC拆分,测定鼠肝微粒体中阿替洛尔各对映体含量.结果:建立了在碱性条件下从水相中用乙酸乙酯提取阿替洛尔,用GITC进行柱前手性衍生化,以及用流动相NaH2PO4缓冲液-CH3OH-CH3CN(50:20:30)在ODS柱上拆分的分析方法,254 nm波长处检测.阿替洛尔对映体在1～20 μg·mL-1范围内呈良好线性关系,S(-)-阿替洛尔:Y=840 076.5X+141 742.8,r=0.999 8;R(+)-阿替洛尔:Y=873 157.2X+192 187.5,r=0.999 8),LOD为55 ng·mL-1,LOQ为145 ng·mL-1(RSD<7%),相对回收率在95%～105%(RSD<5%).用此方法试验了阿替洛尔在鼠肝微粒体中的代谢测定.结论:结果表明此方法可用于研究阿替洛尔消旋体在鼠肝微粒体中代谢和酶动力学研究.