HPLC-ELSD-UV法同时测定人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的含量

摘要

目的:建立了人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的HPLC-ELSD-UV含量测定方法.方法:采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,0.1%醋酸溶液(A相)和甲醇(B相)为流动相梯度洗脱,流速:1.6 mL·min-1,紫外检测器(检测波长450 nm)和蒸发光散射检测器联用检测,柱温为室温.结果:测定了16个人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的含量.胆固醇在0.2204～1.653 mg·mL-1、胆红素在0.536～21.44μg·mL-1、各种胆酸在0.2～1.5 mg·mL-1范围内呈良好的线性关系;平均回收率分别为99.8%,101.5%,96.5%～101.2%,RSD分别为1.86%、1.71%、0.53%～2.14%(n=9);人体胆结石中的胆固醇、胆红素含量大多在776.3～972.5μg·mg-1和0.639～2.981μg·mg-1,各种胆酸未检出.结论:本法操作简便、快速、准确、适用范围广,可用于对人体胆结石中胆固醇、胆红素及各种胆酸的同时测定.