离子色谱分离保留因子计算定性分析低聚壳寡糖的研究

摘要

目的:建立阴离子交换色谱分离,并用保留因子计算法定性分析低聚壳寡糖。方法:首先利用高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培检测法(HPAEC-IPAD)对5种壳寡糖(聚合度DP=2~6)标准样品进行分离;分离条件:采用DIONEX CarboPac·PA10(4.0 mm×50 mm)保护柱和DIONEX CarboPac·PA10(4.0 mm×250mm)分析柱,淋洗液采用氢氧化钠溶液,积分脉冲安培法检测。然后用建立的分离方法对壳寡糖样品进行分离并定性。再根据所得样品色谱峰的保留时间分别计算保留因子,建立壳寡糖聚合度(DP)与其保留因子(k')的相关关系,根据建立的相关关系对未知的壳寡糖进行定性,并用质谱方法对未知壳寡糖样品进行验证。结果:壳寡糖聚合度的对数值与其保留因子的对数值具有线性关系,回归系数R^2≥0.998 7,利用建立的线性回归方程对样品中的4种未知壳寡糖样品的定性结果为壳七糖、壳八糖、壳九糖和壳十糖,误差≤5.66%。质谱方法对未知壳寡糖样品进行了验证,验证结果为样品中存在壳二糖、壳三糖、壳四糖、壳五糖、壳六糖、壳七糖和壳八糖。结论:对于壳寡糖样品用离子色谱分离,保留因子计算来定性壳寡糖聚合度的方法是可行的。