基因检测在儿童严重急性呼吸综合征疑似病例诊断中的应用

摘要

目的通过病原学检测鉴别诊断严重急性呼吸综合征(SARS).方法对1例没有明确SARS接触史,入院时临床诊断疑为"支原体肺炎"的患儿进行病原学鉴别诊断.(1)对患儿的咽拭子标本进行常见呼吸道病毒(包括呼吸道合胞病毒、甲、乙型流感病毒、腺病毒和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型副流感病毒)的抗原检测.(2)用RT-PCR进行人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒的检测.(3)采用巢式RT-PCR方法,进行SARS病毒基因检测.根据WHO在网上公布的SARS冠状病毒复制酶基因1b区合成3对引物,其中1对为所有冠状病毒所保守的,用来进行第一次PCR,另2对为SARS冠状病毒所特异的,分别用于第二次PCR,这2对引物可分别扩增368和348bp的基因片段.结果患儿咽拭子标本7种常见呼吸道病毒和人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒的检测结果均为阴性,而用不同引物对检测,SARS冠状病毒基因均为阳性.经测序显示,该基因片段与GenBank已公布的17株SARS冠状病毒的序列同源性为100%,而与人冠状病毒的标准株有很低的同源性.同时该患儿的恢复期血清SARS冠状病毒特异性IgM和IgG均为阳性.结论从患儿标本中未检测到常见的7种呼吸道病毒、人类偏肺病毒、肠道病毒和鼻病毒,而检测到了SARS冠状病毒.经病原学检测,确诊患儿为SARS.在SARS流行期间,用检测常见呼吸道病毒抗原或基因的方法,可以将儿科的急性呼吸道病毒感染与SARS进行区别.