塞来昔布对神经母细胞瘤细胞生长周期的影响及机制的研究

摘要

目的探讨特异性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布（celecoxib）对人神经母细胞瘤细胞系SH SY-5Y细胞生长周期的影响及其分子生物学作用机制。方法不同浓度组塞来昔布处理SH-SY-5Y细胞,倒置显微镜观察药物作用后的细胞形态学变化,MTT法检测各浓度组作用48 h后细胞的增殖情况,流式细胞仪检测不同浓度塞来昔布作用后对细胞周期的影响,Western blot检测药物作用前后细胞周期蛋白CyclinD1、P16、P21蛋白表达的变化。结果①不同浓度塞来昔布作用后,倒置显微镜观察到细胞形态学改变,SH-SY-5Y细胞为细长的梭形,少数呈类三角形,随着药物浓度的增加,细胞变短、变圆,整个细胞的形态由梭形逐渐变为类多角形,最后细胞间隙增大,细胞变圆;②MTT法显示,塞来昔布以10、20、40、80μmol/L分别作用于SH-SY-5Y细胞48 h时,其细胞增殖率分别为（90.1±3.6）%、（69.3±3.7）%、（44.2±4.6）%、（10.2±2.9）%,不同浓度组间比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,塞来昔布在一定剂量范围内以剂量依赖性的方式抑制SH-SY-5Y细胞的生长;③流式细胞仪检测发现随药物作用浓度增加,当塞来昔布以0、10、20、40、80μmol/L分别作用于SH SY-5Y细胞48 h时,G0/G1期细胞比例分别为（50.7±4.0）%,（55.1±5.2）%,（67.2±3.9）%,（71.1±3.8）%,（75.5±4.8）%,其中20、40、80μmol/L组与未加药组比较,差异有统计学意义（P＜0.01）;④Western blot显示随着药物浓度的增加,细胞中CyclinD1蛋白的表达水平逐渐降低,细胞中P21、P16蛋白的表达水平逐渐增加。结论塞来昔布抑制SH-SY-5Y细胞的生长并阻滞细胞生长在G1期,其机制与通过抑制细胞周期蛋白CyclinD1的表达及增加细胞周期蛋白抑制因子P21、P16表达可能有关。塞来昔布可望成为神经母细胞瘤治疗的新的药物。